【摘 要】
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该研究的目的就是从中国特有的掌叶半夏(Pinellia pedatiseeta)中纯化出胰蛋白酶抑制剂,为进一步得到具有中国自主知识产权的半夏胰蛋白酶抑制剂基因打下基础.在该项研究中,
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该研究的目的就是从中国特有的掌叶半夏(Pinellia pedatiseeta)中纯化出胰蛋白酶抑制剂,为进一步得到具有中国自主知识产权的半夏胰蛋白酶抑制剂基因打下基础.在该项研究中,以掌叶半夏的块茎作为材料,通过硫酸铵分级沉淀得到半夏的粗蛋白.将粗蛋白脱盐后通过胰蛋白酶亲和柱得到一个具有胰蛋白酶抑制活性的蛋白峰.该蛋白在阴离子交换柱上表现为一个峰,通过改变缓冲液的pH值和洗脱时的离子强度也未能将其分开.改用阳离子交换柱后,在酸性条件下分离得到了三个峰.对其中的一个峰进行分析,发现其在凝胶过滤柱上表现为一个单一的蛋白,以凝胶柱蛋白质分子量标准作为参照,该蛋白的分子量约为41kD.在等电聚焦电泳中,该蛋白表现为一条带,pI值在4.5左右.在SDS-PAGE中,该蛋白表现为三条带,分子量分别为22kD、15kD和8kD.该蛋白对胰蛋白酶的抑制活力为56.25u/mg(以TAME作为底物).通过以上的实验现象,初步断定,所纯化的蛋白质为一种胰蛋白酶抑制剂,由三个亚基组成.关于该蛋白的其它性质有待于进一步研究.
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