过表达SCD1对骨髓间充质干细胞成内皮分化的影响及其机制研究

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研究目的:探讨过表达固醇辅酶A去饱和酶1(SCD1)对骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)成内皮作用的影响,并通过基因芯片及智能通路(IPA)分析系统研究全基因组表达谱变化,探究SCD1影响BM-MSCs成内皮分化的机制。研究方法:利用已构建成功的SCD1慢病毒转染BM-MSCs,采用RT-PCR及C14技术检测SCD1在BM-MSCs中过表达情况及其活性。内皮诱导培养过表达SCD1的BM-MSCs后,采用RT-PCR技术、细胞免疫荧光技术及蛋白免疫印迹技术(Western Blot)检测CD31、vWF及CDH5等相关内皮指标,进一步运用全基因芯片检测SCD1过表达对BM-MSCs成内皮分化表达谱的影响。研究结果:BM-MSCs成功过表达SCD1并保持高活性。RT-PCR结果显示和对照组相比,过表达组的内皮指标CD31、vWF及CDH mRNA高于对照组(p<0.05)。细胞免疫荧光及WB结果显示,过表达组内皮指标表达明显高于对照组。基因芯片结果显示过表达SCD1后,改变BM-MSCs内皮分化的部分基因表达谱。IPA结果显示抗氧化通路及细胞分化功能的表达差异显著(p<0.05)。流式细胞仪结果显示,过表达组的ROS水平明显低于对照组,且S期细胞明显多于对照组。研究结论:SCD1过表达可通过降低细胞氧化应激、提高细胞增殖分化能力促进BM-MSCs的成内皮分化。SCD1促进BM-MSCs成内皮分化的作用可能为骨折愈合、体外成骨及心血管疾病治疗及体外成骨提供新的思路。
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