目的:烟曲霉是一种常见的、通过空气传播的条件致病真菌,对于烟曲霉的致病机制,虽然发现了一些与其致病性相关的因子,但到目前为止还未证实其在烟曲霉致病性中起关键作用。因此本实验利用构建的烟曲霉金属还原酶基因(AF UA-1G00350,Fre B2)缺失突变株,对烟曲霉金属还原酶基因Fre B2功能进行初步研究,为揭示该基因与烟曲霉的致病关系提供基础。方法:比较野生株和基因缺失突变株在AMM和无铁AMM液体培养基中生长时金属还原酶的活性,绘制不同时间野生株和基因缺失突变株在AMM和无铁AMM液体培养基中生长时金属还原酶活性曲线。利用Real-Time PCR方法分析Sre A、Sid A、Fet C、Ftr A和Fre B这些与铁的吸收相关基因的m RNA的表达量变化。测定野生株和基因缺失突变株对氧化压力的敏感性及胞内活性氧物质阳性细胞率。结果:金属还原酶活性测定实验发现,不论在AMM液体培养基中还是在无铁AMM液体培养基中培养时,突变株金属还原酶的活性都明显高于野生株。Real-Time PCR结果显示,与野生株相比培养60h时,突变株Sre A、Sid A、Fet C、Ftr A和Fre B这些与铁的吸收相关基因的表达量出现明显上调。氧化压力敏感性实验显示,基因缺失突变株对H2O2的敏感性显著增强,同时胞内活性氧物质阳性细胞率明显增多。结论:金属还原酶基因Fre B2在烟曲霉铁吸收及氧化压力应答过程中发挥作用;烟曲霉与铁吸收相关基因之间存在功能互补效应。