【摘 要】
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目的 构建人肝癌细胞裸鼠移植瘤模型;研究环氧化酶—2(COX-2)抑制剂塞来昔布(celecoxib)对人肝癌裸鼠皮下移植瘤的预防和抑制作用:探讨塞来昔布预防和抑制肝癌的作用机制及其相
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目的 构建人肝癌细胞裸鼠移植瘤模型;研究环氧化酶—2(COX-2)抑制剂塞来昔布(celecoxib)对人肝癌裸鼠皮下移植瘤的预防和抑制作用:探讨塞来昔布预防和抑制肝癌的作用机制及其相关机理,为肝癌治疗提供新的靶点。 材料和方法 使用裸小鼠作为实验动物,4-5周龄,雄性,按SPF级饲养。人原发性肝癌细胞株SMMC-7721用含有15%小牛血清的DMEM在37℃,5%CO2条件下培养;蛋白质印迹(Western Blot)检查SMMC-7721的COX-2的表达水平;收集肿瘤细胞,调整细胞悬液浓度至4×107/ml。于裸鼠背部皮下注射细胞悬液0.1ml(细胞总数为4×106),建立人肝癌裸鼠皮下移植瘤动物模型。 将裸鼠随机分为四组:①空白对照组;②低剂量预防组;③高剂量预防组;④单纯治疗组。两预防组,在接种前三天起每日给予两种不同浓度的塞来昔布口服,组4待肿瘤生长至直径约0.2cm时,给予高浓度塞来昔布治疗。饲养五周,观察各组动物的肿瘤生长曲线,取肿瘤标本作蛋白质印迹(Western Blot)检查COX-2的表达水平;免疫组织化学检查(SP法)检测对照组和高剂量预防组肿瘤的VEGF、caspase3、caspase9、MMP2的表达和微血管密度(MVD),利用TUNEL染色法行原位细胞凋亡分析。 采用SPSS11.5统计分析软件进行数据处理。免疫组化的统计分析采用Fisher确切概率法检验。其他实验数据以(?)±s表示,采用单因素方差分析和Newman-Keuls法。 结果 1.Western Blot法在SMMC-7721细胞和移植瘤组织中均可检测到COX-2蛋白的表达。
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