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蚜虫是重要的农业害虫之一。其中,苹果黄蚜的危害给苹果生产业造成极大的损失,然而现代农业上主要依靠化学农药防治蚜虫,农业“3R”问题也因化学农药的滥用更加严重,并且影响苹果的质量和品质。因此,研发对环境友好的杀虫剂已经迫在眉睫。破坏素是由虫生真菌绿僵菌分泌的次级代谢产物,具有广谱性的杀虫活性。破坏素与近年来占据市场上主导的Bt毒蛋白相比,其不易产生抗药性且具有高效杀虫活性。作为作用机理全新的绿色杀虫剂,破坏素在农业害虫防治上具有更好的前景。但是由于目前生产破坏素的成本较高,很难应用于农业生产实践中,所以对其作用机理进行研究有助于新型杀虫剂的研发和应用。有研究表明破坏素会影响昆虫先天免疫反应,但是影响机制尚不明确。本文以苹果黄蚜为研究对象,通过测定破坏素处理前后苹果黄蚜的转录组数据库,筛选出破坏素潜在的作用的靶标基因B类清道夫受体(Scavenger receptor class B,SR-B);对SR-B的分子生物学特性进行分析;通过表达重组蛋白SR-B和利用RNAi技术研究SR-B在苹果黄蚜先天免疫中的功能;阐明破坏素对苹果黄蚜介导的免疫反应的作用机理:1.通过转录组测序技术比较破坏素处理苹果黄蚜6h后的差异表达基因,结果显示:破坏素处理6h后,共鉴定出735个差异表达基因,其中305个基因上调,430个基因下调,筛选出受破坏素调控的苹果黄蚜免疫相关基因-B类清道夫受体。2.对响应破坏素的苹果黄蚜B类清道夫受体(SR-B)进行克隆,获得了该基因的cDNA全长,并成功上传GenBank数据库,登录号为MN840488,其含有一个典型的CD36结构域。通过BLAST发现苹果黄蚜SR-B与棉蚜的相似度为93%。RT-qPCR结果显示SR-B在苹果黄蚜的成虫及有翅成虫中特异性高表达,并且在蚜虫不同组织部位中,腹部的表达量最高。3.微生物诱导苹果黄蚜6h后,SR-B表达量升高,而相比大肠杆菌,绿僵菌侵染12h后SR-B表达量明显下降,破坏素处理后SR-B的表达量呈现先升高后降低的趋势,说明破坏素抑制苹果黄蚜SR-B的表达。构建了AcSR-B原核表达载体,并对重组蛋白rAcSR-B的免疫活性进行了分析。结果表明:rAcSR-B对大肠杆菌和绿僵菌孢子都具有凝集活性,这说明了AcSR-B对微生物具有识别功能,在免疫反应中起着重要作用。4.利用饲喂法对苹果黄蚜进行RNA干扰,通过饲喂不同浓度dsAcSR-B干扰基因表达后,发现随着dsRNA的浓度增加,苹果黄蚜的死亡率逐渐升高。以浓度为500ng/μL dsRNA干扰SR-B后,对破坏素的毒力具有显著的增效作用。干扰苹果黄蚜SR-B,同样抑制了蚜虫的酚氧化酶活及黑化反应。破坏素处理同样会抑制苹果黄蚜酚氧化酶的活性,进而影响黑化反应。综上所述,SR-B是破坏素的潜在作用靶标,破坏素通过抑制SR-B的表达,从而影响苹果黄蚜的黑化免疫反应。本研究揭示了破坏素作用于苹果黄蚜先天免疫的作用靶标,并进一步阐明了破坏素通过SR-B抑制苹果黄蚜免疫反应机理。研究结果为以破坏素作用方式为模板基于RNAi技术的害虫绿色防控提供靶标基因和害虫绿色防控新策略,对绿色农业的可持续发展具有重要意义。