蓖麻粕中蓖麻碱的提取分离及生物活性研究

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生物碱具有显著的生理活性,是科学家进行研究最早、最多的一类天然产物。蓖麻为大戟科草本植物,是世界十大油料作物中含油量较高的一种经济作物,在全世界范围内广泛种植。蓖麻粕是蓖麻籽榨出油后剩余的残渣,含有非常丰富的蛋白和天然活性物质。蓖麻碱是蓖麻粕中的一种重要天然活性成分,具有杀虫、保肝、镇痛和中枢神经兴奋等生理活性,拥有非常广阔的开发前景。  本课题以蓖麻粕为研究对象,研究不同提取方法对蓖麻碱提取率的影响,筛选出最优提取方法和提取条件;研究蓖麻碱纯化工艺并优化蓖麻碱纯化工艺条件;采用紫外光谱法、红外光谱法和质谱法分析鉴定纯化后的蓖麻碱结构;初步研究了蓖麻碱的抑菌活性和抗氧化活性;以期为蓖麻碱的高效开发利用、拓宽利用途径提供一些基础数据。  (1)蓖麻粕中蓖麻碱的提取工艺优化研究  以水为提取溶剂,对超声波辅助提取、微波辅助提取和超声波协同微波辅助提取蓖麻碱工艺进行优化,并对其结果进行比较。超声波辅助提取蓖麻碱的最佳工艺条件为:超声波功率300 W、料液比1∶10(g/mL)、提取时间30min、提取温度80℃。在此条件下得到蓖麻碱的提取率为80.15%。微波辅助提取蓖麻碱的最佳工艺条件为:微波功率408 W,提取时间5.2 min,料液比1∶12(g/mL)。在此条件下得到蓖麻碱的提取率为50.81%。超声波协同微波辅助提取蓖麻碱的最佳工艺条件为:超声波功率300 W、微波功率400 W、料液比1∶12(g/mL)、提取时间6min。在此条件下得到蓖麻碱的提取率为78.23%。通过比较得出超声波辅助提取法优于微波辅助提取法和超声波协同微波辅助提取法。  (2)蓖麻碱粗提物的纯化工艺研究  采用三氯甲烷精制蓖麻碱粗提物,通过正交实验优化精制工艺条件。三氯甲烷精制蓖麻碱粗提物的最佳工艺条件为:精制温度90℃、料液比1∶7.5(g/mL)、精制时间3h。采用乙醇重结晶法纯化蓖麻碱,考察乙醇重结晶次数对蓖麻碱纯度的影响。结果表明:乙醇重结晶的最佳次数为3次。在此条件下蓖麻碱的纯度达到99.39%。  (3)蓖麻碱的结构鉴定研究  通过对紫光光谱分析得到蓖麻碱的最大特征吸收峰为313砌,综合红外光谱的特征官能团信息、质谱中的分子量信息和相关文献信息,确定提取物为蓖麻碱。通过扫描电镜(SEM)表征蓖麻碱的形貌,分析SEM图得到蓖麻碱为棱柱状结晶体。  (4)蓖麻碱的生物活性研究  通过蓖麻碱对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)清除能力、超氧自由基(O2-·)清除能力、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基(ABTS·)清除能力和Fe3+还原能力研究了蓖麻碱的体外抗氧化活性。结果表明:蓖麻碱对DPPH·具有较强的清除能力,对O2-·和ABTS·具有一定的清除能力,对Fe3+具有一定的还原能力。通过光电比浊法和滤纸片法测定蓖麻碱的抑菌性,结果表明蓖麻碱对大肠杆菌、淀粉液化芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌都具有抑菌作用,对各种菌的抑制效果为:大肠杆菌>淀粉液化芽孢杆菌>金黄色葡萄球菌。
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