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1．运用银染mRNA差异显示方法分析罗非鱼性别差异基因 建立非同位素银染mRNA差异显示方法，分离性别相关基因。本文从罗非鱼的性腺提取的总RNA为模板，用5’dT11N锚定引物和两个随机引物以及一个长引物组合进行DDRT-PCR扩增。经10％聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后，用银染方法显示差异DNA条带，在直观下从凝胶中回收差异条带并进行再扩增，琼脂糖电泳检测，得到四个差异片段，回收产物克隆入PUCm-T载体，送生物公司测序，将序列与Internet网上多种公共生物信息数据库进行比较，分析未知基因的结构与功能。在本实验中共得到四个差异基因，其中两个为奥利並雄性特有，两个为尼罗雄性特有，经分析这四个基因在以前的研究中均未见有报道，所以其应为新基因。 2．罗非鱼中SRY基因同源序列的比较分析 SRY是哺乳动物性别决定因子。本文中根据人的SRY基因来设计一对引物，它特异扩增正常男性SRY基因含保守区在内约600bpDNA片段，用引物对奥利亚、尼罗罗非鱼的基因组进行扩增，在雌雄间均出现了相同的三条带，回收600bp大小的片段，克隆入PUCm-T载体，送生物公司测序。序列结果经ClustalW软件进行同源性分析，显示其在雌雄个体间和两个物种间无差异。