丹参注射液对SD大鼠退变椎间盘组织病理学的研究

来源 :广西中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yuggmacc
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:  1.①通过动物实验探讨折尾法持续牵张与椎间盘组织学改变的关系;②采用折尾法持续牵张力对椎间盘组织学改变的作用机理,为椎间盘退变模型的筛选提供一种较简便的实验模型。  2.①研究并探讨丹参注射液对退变椎间盘组织病理学改变的关系;②通过丹参注射液对SD大鼠退变椎间盘模型的实验研究,来为临床中药活血化淤止痛法治疗腰腿痛提供理论依据;③通过该实验为进一步探索发掘预防及治疗退变椎间盘,提供新的思路和方法。  方法:  1.第一阶段:选用36只SD大鼠为研究对象,将其随机分为正常组12只(A1、A2组各6只)、造模组24只。造模组内有又分:对照组12只(B1、B2组各6只)和实验组12只(C1、C2组各6只)。正常组不作特殊处理,其余造模动物组均使用自制捆绑带将鼠尾折成“U”型,在生理弯曲范围内,每日早晚2次,每次1-2小时。1~2个月后,每隔7天分批从2组:A1组和造模组(B1组、C1组)动物模型中选取2只,用1%氯胺酮50mg/kg腹腔注射麻醉,将大鼠尾部消毒铺无菌巾,距鼠尾根部1cm处切断鼠尾并缝合伤口。同时,祛除鼠尾的皮肤及周围粘连的韧带等多余组织,再用生理盐水冲洗干净后,臵于4%中性福尔马林固定溶液中浸泡固定,并在4℃冰箱保存24 h后,用锋利的组织刀片切开尾部椎间盘,分别选取3-4个椎间盘组织做标本。然后,依次进行脱钙,酒精递度脱水,常规石蜡包埋,超薄切片机制备5μm组织切片,进行HE染色。光镜及电镜下组织学观察,用以确定椎间盘退变模型造模是否成功。  2.第二阶段:在第一阶段确定椎间盘退变模型造模成功的基础上展开。剩余正常组(A2组)不作特殊处理。剩余对照组(B2组)给予0.9%生理盐水2ml灌胃处理;剩余实验组(C2组)予丹参注射液2ml进行灌胃处理。1个月后,从3组(A2组、B2组、C2组)动物模型中每隔7天分批选取2只,分别用1%氯胺酮50mg/kg腹腔注射麻醉,将大鼠尾部消毒铺无菌巾,距尾根部1cm处切断鼠尾并缝合伤口,祛除鼠尾的皮肤和周围的组织及粘连的韧带等多余组织。用生理盐水冲洗干净后,臵于4%中性福尔马林固定溶液中浸泡固定,并在4℃冰箱保存24h后,用锋利的组织刀片切开尾部椎间盘,分别选取3-4个椎间盘组织做标本。然后,依次进行脱钙,酒精递度脱水,常规石蜡包埋,超薄切片机制备5μm组织切片,HE染色后,光学显微镜及高倍电子显微镜下观察髓核,纤维环组织改变。  结果:  1.第一阶段:常规HE染色时,每个标本光镜下至少观察5个视野,纤维环外层组织嗜伊红,呈红色,内层组织嗜碱性,呈紫色;弹力纤维呈亮粉红色,胶原纤维被伊红染成淡粉红色,软骨细胞的细胞胞浆着色呈黑蓝色。A1正常组:镜下见椎间盘内的细胞均匀分布,形态正常。椎间盘纤维环完整、包绕髓核,其纤维成致密板层状排列,髓核居中(见图A1,HE×100)。造模组(B1组与C1组)的结构基本一致(见图造模组,HE×100)。镜下见:纤维环排列较杂乱,纤维肿胀或断裂,甚至可见微小裂隙,在断裂带出现了大量的白细胞以及大片状增生的胶原纤维,其中细胞增多;髓核细胞数量不断减少,髓核组织中有着少量髓核细胞,形态不规则,分布不均匀;纤维软骨组织增生,排列紊乱;少数可见有血管翳的生长。  2.第二阶段:常规HE染色时,每个标本光镜下至少观察5个视野,纤维环外层组织嗜伊红,呈红色,内层组织嗜碱性,呈紫色;弹力纤维呈亮粉红色,胶原纤维被伊红染成淡粉红色,软骨细胞的细胞胞浆着色呈黑蓝色。视野中有黑蓝色细胞表达的计为软骨细胞阳性表达(+),未出现黑蓝色细胞表达,计为软骨细胞阴性表达(-)。A2正常组镜下见椎间盘结构基本上与A1正常组一致(见图A2,HE×100),大部分标本软骨细胞阴性表达(-)。B2对照组与B1对照组和C1实验组的结构基本一致,大部分标本软骨细胞阳性表达(+),同时有大片增生的胶原纤维,其中细胞逐渐增多。C2实验组镜下见:绝大多数标本软骨细胞阳性表达(+),增生的胶原纤维数量较 B组减少,有逐渐被消退的趋势;局部还可以看到白细胞的浸润,程度较 B组轻;纤维软骨细胞逐渐增多,排列紧密;可见有较多的血管翳生长(见图C2,HE×100)。A1组~C2组软骨细胞呈阳性表达的例数分别为0例、5例、5例、1例、5例、6例,所得数据进行统计学分析。A1组和B1组比较:P=0.0034,P<0.05;A1组和C1组比较:P=0.0034;B1组和C1组比较:P=1.0000;A2组和B2组比较:P=0.0209,P<0.05;A2组和C2组比较:P=0.0005,P<0.05.均有统计学差异。  结论:  1.折尾法反复持续对SD大鼠鼠尾的牵张可引起椎间盘组织病理学的改变。  2.丹参注射液可引起SD大鼠退变椎间盘组织内增生的胶原纤维数量和局部白细胞的浸润范围减少,可见到有较多的血管翳生长,但椎间盘组织内纤维软骨细胞数量的改善不明显。
其他文献
目的:通过研究气瘿切除后病理类型与超声的相关性,旨在探讨超声特征与病理阶段的相关性,以期指导临床诊治。方法:收集中医诊断为气瘿,西医诊断为结节性甲状腺肿的患者41例,全
目的:探讨壮肝逐瘀煎联合普萘洛尔对肝硬化门脉高压患者血流动力学的影响机制。  方法:选择确诊为肝硬化门脉高压患者60例,随机分成治疗组和对照组,两组均在给予低盐饮食、保肝
目的:观察柴郁温胆汤治疗抑郁症痰气郁结证的临床疗效;从调节脑内神经递质和炎症反应的角度探讨柴郁温胆汤治疗抑郁症的作用机制,为中药抗抑郁症复方的研发提供思路和依据。