补肾通络方预防性治疗急性EAE大鼠的疗效研究及机制探讨

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目的:建立急性实验性自身免疫性脑脊髓炎(experiment alautoimmune encephalomyelitis,EAE)大鼠模型,观察补肾通络方预防性治疗对急性EAE大鼠的影响,探讨补肾通络方预防性治疗急性EAE大鼠的部分作用机制,为临床应用提供实验依据。  方法:用豚鼠脊髓匀浆-完全福氏佐剂(GPSCH-CFA),主动免疫Wistar大鼠,7天后用豚鼠脊髓匀浆-不完全福氏佐剂(GPSCH-IFA)再次免疫,建立EAE模型。应用不同剂量补肾通络方预防性给药,观察各组临床体征,记录每日临床评分和体重变化,分别在发病高峰期和恢复期处死动物,HE染色观察组织病理改变,ELISA法测定腰膨大TGF-β1含量,用IPP软件分析系统测定TGF-β1阳性反应物平均光密度值(OD值)和积分光密度值(IOD值),然后进行统计学分析。  结果:(1)中药高剂量组大鼠的发病率与模型组相比明显减低(P<0.05);中药高剂量组大鼠的神经功能评分明显低于模型组;中药高剂量组大鼠的平均起病天数较模型组、中药中剂量组及中药低剂量组明显延迟(P<0.01);中药高剂量组大鼠的体重比明显高于模型组、中药中剂量组及中药低剂量组(P<0.01)。  (2)中药高、中剂量组大鼠脑和脊髓内的炎性细胞浸润程度改变与模型组及中药低剂量相比,均有不同程度减轻,中药高剂量组比中药中剂量组病变减轻程度更为明显。  (3)中药高剂量组与模型组、中药中剂量及中药低剂量组比较,TGF-β1表达在急性期显著升高(P<0.05),在缓解期亦显著升高(P<0.05);模型组较正常组TGF-β1表达明显下降;模型组与中药中剂量组及中药低剂量组之间在发病期比较无显著性差异(P>0.05)。模型组大鼠腰膨大TGF-β1在缓解期较正常组、中药低、中剂量组无明显差别(P>0.05)。  结论:(1)补肾通络方可以明显降低EAE大鼠的发病率,推迟起病时间,抑制体重下降,减轻发病时神经功能损伤的程度。  (2)补肾通络方可以减轻EAE大鼠中枢神经系统内炎性细胞浸润的程度。  (3)补肾通络方可以增高中枢TGF-β1含量,下调免疫反应,抑制EAE发病,且这种作用有剂量相关性,结果提示补肾通络方在预防多发性硬化复发方面有一定应用前景。
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