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弄蝶科Hesperiidae隶属于鳞翅目Lepidoptera:弄蝶总科Hesperioidea,中国已知4亚科83属370种。近年来从形态学,分子生物学等方面对弄蝶科系统发育研究有一些报道,但目前国内对弄蝶科昆虫较为全面的分子系统学研究还非常少。本研究以线粒体Cyt b、ND1、CO I及16S rDNA为分子标记,对弄蝶科部分种类的系统发育关系进行了重建,为弄蝶科的系统学研究提供了分子证据。本研究采用PCR产物直接测序和部分基因克隆测序的方法分别测定了弄蝶科4亚科48属75种106个个体的线粒体Cyt b基因部分片段,测定了4亚科49属72种弄蝶90个个体的线粒体ND1基因部分片段,测定了4亚科31属38种弄蝶47个个体的线粒体CO I基因部分片段,测定了3亚科24属31种弄蝶36个个体的线粒体16S rDNA基因的部分片段;对四个基因序列片段的组成成分、替换饱和性、分类单元碱基组成的偏向性进行了检验;对38属47种弄蝶Cyt b和ND1两个基因联合序列和19属20种弄蝶Cyt b、ND1和CO I三个基因联合序列的组成成分、替换饱和性、分类单元碱基组成的偏向性也进行了检验。采用最大简约法(Maximum parsimony MP)、最大似然法(Maximum likelihood ML)和贝叶斯法(Bayesian inference BI)分别利用Cyt b、ND1、CO I、16S rDNA及Cyt b和ND1两个基因片段组成的联合数据集和Cyt b、ND1和CO I三个基因片段组成的联合数据集构建系统发育支序图,以Warren et al.(2008,2009)提出的世界弄蝶分子分类系统与分子与形态特征整合的分类系统为参照系统,进行聚类分析,明确了相关各个单元单系群性质,共同衍征,或主要鉴别特征,提出了以分子系统分类为主要框架的中国弄蝶分类系统。结果如下:经比对处理后弄蝶科48属75种106个个体弄蝶线粒体Cyt b基因序列长度为380bp,其中保守位点157个,变异位点223个,简约位点196个,A+T平均含量74.1%;49属72种90个个体弄蝶线粒体ND1基因序列长度为471bp,其中保守位点167个,变异位点304个,简约位点244个,A+T平均含量79.5%;31属38种47个个体弄蝶的线粒体CO I基因序列长度为576bp,其中保守位点339个,变异位点237个,简约位点201个,A+T平均含量69.7%;24属31种36个个体弄蝶的线粒体16S rDNA基因序列长度为430bp,其中保守位点36个,变异位点388个,简约位点359个,A+T平均含量79.6%;38属48种弄蝶的线粒体Cyt b和ND1联合基因序列长度为778bp,其中保守位点331个,变异位点447个,简约位点362个,A+T平均含量77.1%;19属21种弄蝶科Cyt b和ND1和CO I线粒体联合基因序列长度为1 363bp,其中保守位点718个,变异位点645个,简约位点544个,A+T平均含量73.1%。它们都符合昆虫线粒体所具有的高A+T含量。Cyt b、ND1、CO I、16S rDNA和Cyt b+ND1,Cyt b+ND1+CO I联合基因中,核苷酸的替代转换均高于颠换。提出中国弄蝶科分为五个亚科:竖翅弄蝶亚科Coeliadinae+(珍弄蝶亚科Eudaminae+花弄蝶亚科Pyrginae+ (链弄蝶亚科Heteropterinae+弄蝶亚科Hesperiinae)。竖翅弄蝶亚科Coeliadinae:中国记录5属,分子检测4属,为一单系群,已明确共同衍征。珍弄蝶亚科Eudaminae:是2009年世界新确定的亚科,检测1属——带弄蝶属Lobocla,是该亚科分布于新热带区与新北区之外的唯一属。花弄蝶亚科Pyrginae:中国已知23属,取样19属,除带弄蝶属Lobocla划分到珍弄蝶亚科外,其它18属的分族地位未确定,有待进一步深入研究。链弄蝶亚科Heteropterinae:中国已知5属,检测了3属,分为链弄蝶族Heteropterini(4属)与银弄蝶族Carterocephalini(1属)。弄蝶亚科Hesperiinae:中国已知50属,本研究进行分子检测28属,为单系群。分为7族:锷弄蝶族Aeromachini+(腌翅弄蝶族Astictopterini+(旖弄蝶族Isoteinonini+(钩弄蝶族Ancistroidini+(黄弄蝶族Taractocerini+(弄蝶族Hesperini+刺胫弄蝶族Baorini)))))。锷弄蝶族Aeromachini:中国已知12属,分子检测8属,明确7属的系统位置。腌翅弄蝶族Astictopterini:仅1属,确定了族级系统地位。旖弄蝶族Isoteinonini:中国已知15属,分子检测了5属,明确了族级及4个属的分子系统地位。钩弄蝶族Ancistroidini:中国已知7属,分子检测4属,明确了族级及4个属的分子系统地位。黄弄蝶族Taractocerini:中国已知5属,分子检测2属,2属未聚为一支。属间关系有待进一步研究。弄蝶族Hesperini:中国已知3属,分子检测3属,为一单系群。不赞同将豹弄蝶属Thymelicus分出成立豹弄蝶族Thymelicini。刺胫弄蝶族Baorini:中国已知7属,分子检测7属。根据孔弄蝶属Polytremis三个种的聚类关系,支持资弄蝶属Zinaida为有效属的观点,应从广义孔弄蝶属Polytremis分出,该族应包括8属。对农业重要害虫直纹稻弄蝶Parnara guttata的两个亚种进行了分子检测,分析表明孟加拉亚种P. guttata mangala应为一独立种(孟加拉稻弄蝶P. mangala)。本研究是对中国弄蝶科进行的一次较大规模的线粒体基因序列分析,为该科的系统发育关系提供了大量分子生物学方面的证据,提出了以分子系统学为基础的中国弄蝶科分类系统,明确了Warren(2009)世界弄蝶科分类系统中未能确定的中国弄蝶科3族17属的系统分类地位。本研究所得270多条序列数据将提交到GenBank,与世界其他蝴蝶研究者共享,将进一步推动弄蝶科系统发育研究。