DHA诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡及其作用机制研究

来源 :南京大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dreamastlxy
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:探究二十二碳六烯酸(DHA)对人胃癌细胞SGC-7901生长的影响及诱导细胞凋亡的作用机制。   方法:   1、MTT法测定DHA对人胃癌细胞SGC-7901增殖的影响;2、Hoechst染色法进行细胞形态学观察,观察DHA处理细胞时形态学的变化;3、Annexin V/PI双染流式细胞术对细胞凋亡定量分析;4、DHA处理后SOD活性的变化;5、硫代巴比妥钠比色法(TBA法)测定细胞脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量变化;6、二硫代二硝基苯甲酸(DNTB)比色法测定谷胱甘肽(GSH)含量7、荧光探针DCFH-DA检测细胞内ROS水平变化;8、DNA琼脂糖凝胶电泳检测SGC-7901细胞凋亡的典型生化改变-DNA的片段化;9、荧光染料罗丹明123检测细胞线粒体膜电位变化。   结果:   1、MTT法显示DHA能有效抑制SGC-7901细胞的增殖,处理24 h后其IC50为80μmol·L-1,且与药物浓度和作用时间呈正相关。而高浓度的DHA虽然对绿猴肾细胞vero增殖有一定的影响,但没有显著性差异。   2、Hoechst染色表明DHA处理SGC-7901细胞后,呈现明显的凋亡形态,细胞核染色质出现碎片和浓缩现象,染色荧光增强。   3、Annexin V/PI双染流式检测表明DHA处理后,细胞凋亡率显著增加,有浓度和时间效应关系。   4、DHA处理细胞后,SOD活性上升;抗氧化剂NAC预处理可以显著降低SOD的活性。   5、脂质过氧化产物丙二醛的含量随着DHA的浓度升高而增加;NAC和DHA复合处理组的MDA水平有所下降。   6、DNTB法测定GSH结果显示DHA处理细胞后,胞内GSH水平下降;NAC是一种抗氧化剂,也是GSH的前体,可以对抗DHA导致GSH的损耗。   7、荧光探针DCFH-DA检测ROS水平,其随DHA但随着作用时间的延长,出现一个峰值,随后恢复到本底水平。   8、DNA琼脂糖凝胶电泳表明DHA处理细胞后,细胞DNA呈梯状排列,是凋亡的典型生化指标,而抗氧化剂NAC可以消除这一现象。   8、荧光染料罗丹明123检测膜电位,表明DHA处理细胞后,细胞内的膜电位并未发生变化。   结论:   1、DHA可以抑制SGC-7901细胞增殖,诱导细胞凋亡,发挥体外抗胃癌作用。   2、DHA处理细胞后,细胞内的MDA水平增高,GSH含量降低,而抗氧化剂NAC可以对抗这一现象。说明在DHA诱导人胃癌细胞SGC-7901凋亡的过程中,脂质过氧化是其中的原因之一;   3、在DHA处理细胞5h后,细胞内的ROS出现一个峰值;处理48h后,DNA呈现梯状条带。NAC预处理,可以降低细胞内的ROS水平。但是,此过程中,线粒体膜电位并没有发生变化。DHA诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡,ROS升高可能是DHA诱导细胞凋亡的重要机制。     
其他文献
随着现代信息产业的快速发展以及物联网、云计算和大数据时代的到来,人类对于信息数据的容量和处理速度的要求都在飞速增加。因此存储技术的发展受到越来越多的关注。相变存储
绝缘体上硅(Silicon-on-Insulator, SOI)技术全介质隔离的结构彻底消除了体硅CMOS器件中的寄生可控硅结构,避免了门锁效应,同时减少了辐射粒子电离产生电荷的收集体积。这使得S
本文通过对荣华二采区10
期刊
光子晶体作为一种人工晶体,是由不同电磁参数材料的周期排列而构成的。当前,光子晶体在微波领域,如微波电路、微波功率放大器、天线、谐振腔、滤波器等方面得到广泛的应用。近年
相对ASIC而言,FPGA已经转变为系统的核心并且其市场份额持续增长。其基本原因在于两个方面。首先,由于ASIC开发成本不断上升,对许多市场而言,判断ASIC的开发成本是很困难的,这完全
学位
摘要:学校是青少年学习的主要场所,但随着社会技术改革的飞速发展,学校所传授的知识已经无法满足学生发展的需求,要想在社会中生存和发展,必须将学习贯彻于一生,必须培养学生终身学习的能力。在终身学习思想的影响下,自主学习能力对于中学生的终身发展具有重要的意义。所以,在高中数学教学阶段中,让学生学会自主学习,提升学生自主学习能力已经成为整个高中教学中的重要组成部分之一。本文结合笔者自身的教学实践,对高中数
氧化锌(ZnO)是一种传统的宽禁带半导体材料。由于其在很多领域展示出的优异性能和应用前景,ZnO近年来受到了广泛的关注。目前,利用可控生长和掺杂制备出具有特定物理性质的ZnO纳
学位
从人体阻抗的测量可以分析出人体的众多身体特征,本文介绍了一种USB2.0接口生物阻抗分析仪的设计原理。本设计采用四电极法的前端激励电极,以ARM7内核的LPC2148微控制器控制AD
种子大小是决定作物产量的重要因素。然而,调控豆科植物种子大小的分子机制仍然未知。本研究通过正向遗传学和全基因组关联分析(GWAS)的方法鉴定出一些可能参与调控蒺藜苜蓿种
随着二十世纪六十年代首次临床上骨髓移植的应用,骨髓移植的应用和兴起已经挽救了成千上万的血液病患者。尽管经历了超过50年的发展,但是出于两方面的原因:1)骨髓移植接受者匹配