【摘 要】
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人生长激素(Human Growm Hormone,hGH)是一种多肽类激素,由人脑垂体前叶嗜酸性细胞分泌,是一种非糖基化的亲水性单链球蛋白。hGH通过与细胞膜表面的hGH受体结合行使其生物学
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人生长激素(Human Growm Hormone,hGH)是一种多肽类激素,由人脑垂体前叶嗜酸性细胞分泌,是一种非糖基化的亲水性单链球蛋白。hGH通过与细胞膜表面的hGH受体结合行使其生物学功能,促进蛋白质合成和组织生长、调节新陈代谢和机体免疫功能,是人体多种代谢途径的重要调节因子,在人体内起着重要作用。我们在家蚕蛹期蛋白中发现一种能与hGH抗体结合的天然蛋白,其表观分子量约为30kD,并通过Western Blotting检测和免疫沉淀的方法确认该蛋白的存在,将其命名为hGH-like蛋白。本课题主要研究家蚕蛹期蛋白中hGH-like蛋白的分离纯化和鉴定,并为进一步研究该蛋白的结构和生物学功能奠定基础。
本文以家蚕蛹冻干粉为原料,经过匀浆、过滤、离心、硫酸铵分段沉淀、超滤对家蚕蛹蛋白进行初步分离,然后经脱盐、冻干进行浓缩和保存。经过初步分离的蛋白样品采用免疫沉淀、亲和层析的方法进一步纯化。再经过双向电泳进一步分离后,进行MALDI-TOF质谱分析获得该蛋白的肽质量指纹图谱(Peptide Mass Fingerprinting,PMF),利用PLGS Browser搜索家蚕蛋白质理论数据库分析鉴定纯化出的蛋白质,搜索结果有三个蛋白有可能是hGH-like蛋白或与其有相互作用的蛋白,在西南农大家蚕理论蛋白库中的编号分别为Bmb019519、Bmb021419和Bmb027808。 鉴于hGH的重要生物学功能和家蚕完全变态生长的特点,家蚕蛹中hGH-like蛋白的研究或具有重要的生物学意义和潜在的临床应用价值,有待进一步研究。
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