过亚硝酸盐羟化脱氧鸟苷反应的抑制剂的研究

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在平流层中有羟基与二氧化氮作用生成过亚硝酸现象的发现,使得过亚硝酸正逐渐成为环境科学领域日益关注的对象。过亚硝酸根是强氧化剂,具有细胞毒性,它不仅能硝化蛋白质、氧化脂质体,而且也可造成DNA 损伤。在生物体的神经细胞、巨噬细胞、内皮细胞中能够自动地生成过亚硝酸根;而且在急性炎症、动脉硬化、再灌注性肌肉萎缩等病理环境中也有过量过亚硝酸根的存在,并观察到由过亚硝酸根引发的DNA 损伤。过亚硝酸根对DNA 的损伤主要有两种形式:DNA 碱基修饰与DNA 单链断裂。在DNA 的四种脱氧核苷中,脱氧鸟苷最易被修饰,并产生两种修饰产物:8-羟基脱氧鸟苷与8-硝基脱氧鸟苷,其中8-羟基脱氧鸟苷是DNA 氧化损伤指标的生物标志物。8-羟基脱氧鸟苷能引发碱基错配,导致基因突变,继而造成细胞癌变。因此,研究过亚硝酸根的抑制剂,减少其对DNA 的损伤,对治疗由此类损伤引发的疾病将有重要的意义。由于过亚硝酸根化学稳定性差、无市售产品,本论文在比较各种过亚硝酸盐溶液制备方法及保存方法的基础上,选择亚硝酸异戊酯与过氧化氢两相法作为制备方法,并改用粉末状二氧化锰处理未反应完的过氧化氢。实验结果表明:在最适处理条件下,过亚硝酸根的浓度可达0.34 摩尔/升,过氧化氢的去除率达95.49%。在研究过亚硝酸根对脱氧鸟苷损伤的过程中,采用体外实验模拟生理条件下( pH=7.4, 37℃) 脱氧鸟苷与过亚硝酸根的反应。研究发现当过亚硝酸根浓度在0-2.5 毫摩尔/升的范围内,8-羟基脱氧鸟苷的生成量随过亚硝酸根浓度的增加而增加。最后研究了槲皮素、黄酮、α-萘基黄酮、咖啡酸、维生素C、谷胱甘肽、硫辛酸对此类损伤的抑制效果。实验结果表明,对于由过亚硝酸根引发的脱氧鸟苷损伤,含羟基的化合物(槲皮素、咖啡酸、维生素C)比不含羟基(黄酮、α-萘基黄酮)有更明显的抑制作用;含巯基的物质(谷胱甘肽、硫辛酸)也可有效抑制这类损伤。
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