【摘 要】
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Cell和HepII是人纤维结合素(fibronectin,Fn)的两个功能结构域. 该课题组已成功在大肠杆菌中表达并纯化了Cell I-HepII双功能结构域重组多肽化、激活作用,在化疗条件下对免疫
【出 处】
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同济医科大学 华中科技大学同济医学院 华中科技大学
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Cell和HepII是人纤维结合素(fibronectin,Fn)的两个功能结构域. 该课题组已成功在大肠杆菌中表达并纯化了Cell I-HepII双功能结构域重组多肽化、激活作用,在化疗条件下对免疫衣保护作用,对荷瘤小鼠体内黑色素瘤有是显的抑制作用.为了更进一步研究Fn对肿瘤的生物治疗与基因治疗及作用机制,表达出更小的免疫原性、更高活性的接近天然状态的真核CH50是一个可尝试研究方向.为此, 研究人员构建出CellI-HepII双结构域的重组多肽的真核表达载体pCH510.该真核表达质粒的5端非编码区(5-UTR)和信号肽区是通过三个引物的半巢式RT-PCR扩增出的,Cell I-Hep II的编码基因来自CH50. 的原核表达载体,另从pFH1质粒切下人Fn的3 端非编码区(3-UTR)将上述三部分系列利用DNA体外重组技术插入到pcDNA3.1质粒,构建出CMV(巨细胞病毒)启动子的真核表达载体pCH510.上述结果表明:该实验成攻构建了人源FN的双功能结构域Cell-HepII真核表达载体, 并初步验证其体内趋化免疫细胞的功能.
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