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目的:双酚A(Bisphenol A,BPA)是公认的环境内分泌干扰物,对心血管系统存在一定的危害作用,但关于这方面的研究还不多。血管通透性异常与心血管疾病的发生密切相关,本研究拟观察BPA对血管内皮细胞通透性的影响,并探索相关机制。方法:采用牛主动脉内皮细胞进行体外培养,使其暴露于不同浓度下的双酚A(1nmol/L-100μmol/L),同时采用细胞外信号调节蛋白激酶A的特异性抑制剂PKI(10μmol/L)进行预处理,分别探究它们对内皮细胞通透性的影响。实验主要分为对照组(DMSO),BPA组和VEGF组(阳性对照组)。用CCK-8试剂盒检测内皮细胞活性;用Western Blot方法检测VE-cadherin和Cav-1蛋白的表达水平;用免疫荧光的方法检测VE-cadherin和Cav-1的的表达情况;用RT-PCR法检测内皮细胞中VE-cadherin、ZO-1、Claudin-5和Cav-1 mRNA表达水平。结果:(1)内皮细胞在100μmol/L BPA的暴露下,其活性显著下降(P<0.05),其他浓度作用下无影响(P>0.05)。(2)0.01μmol/L,0.1μmol/L和10μmol/L BPA暴露下的内皮细胞的通透性均有升高(P<0.05),且以0.1μmol/L的升高最明显。给予PKI预处理,BPA诱导的内皮细胞通透性会继续升高(P<0.05)。(3)不同剂量的BPA暴露下,VE-cadherin蛋白的表达均无影响(P>0.05),而0.1μmol/L BPA能下调VE-cadherin、ZO-1和Claudin-5 mRNA的表达(P<0.05)。(4)低浓度的BPA能上调Cav-1蛋白和其mRNA的表达(P<0.05),而PKI预孵育后,BPA诱导增加的内皮细胞Cav-1蛋白和其mRNA的表达会进一步增加(P<0.05)。结论:0.01μmol/L,0.1μmol/L和10μmol/L BPA作用会使内皮细胞通透性升高,但尚未破坏细胞间的连接,Cav-1蛋白表达提示胞膜窖对大分子物质的跨细胞转运增多。PKA信号通路参与了BPA介导的细胞通透性升高,可能是通过降低胞膜窖的转运来发挥对内皮细胞的“保护作用”。