高原低氧致大鼠胃黏膜组织细胞Beclin-1、LC3-Ⅱ水平变化的研究

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目的:通过检测自噬特异性蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ的蛋白及m RNA表达水平,观察高原低氧环境下大鼠胃黏膜组织细胞自噬的变化,探讨其对胃黏膜损伤的影响。方法:以60只6-8周龄的成年雄性Wistar大鼠为研究对象,随机分成实验组(n=50,低压氧舱,海拔5000m)和对照组(n=10,西宁,海拔2260m),实验组根据进入低压氧舱不同时间点随机分为1d、7d、14d、21d、28d五组,每组各10只。取大鼠胃黏膜组织,HE染色观察组织大体形态改变及组织细胞凋亡情况;免疫组织化学染色法检测自噬特异性蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ的蛋白表达水平;提取大鼠胃黏膜组织细胞总RNA,采用Real-time PCR法检测Beclin-1、LC3-Ⅱ的m RNA表达水平;统计分析相关结果。结果:(1)胃黏膜组织HE染色结果:随着实验组大鼠进入高原低氧环境的时间延长,胃黏膜损伤程度逐渐加重,主要病理表现为胃黏膜腺体结构破坏,大量炎性细胞浸润,局部甚至有出血、凋亡等;(2)免疫组化结果:与对照组相比,实验各组大鼠胃黏膜组织细胞Beclin-1、LC3-Ⅱ的蛋白表达水平均升高,差异具有统计学意义(均P<0.05),且随着暴露于高原低氧环境的时间延长,Beclin-1、LC3-Ⅱ的蛋白表达水平逐渐升高(均P<0.05);(3)Real-time PCR结果:胃黏膜组织细胞Beclin-1、LC3-Ⅱ的m RNA表达水平其变化趋势与蛋白表达水平基本一致,即每组实验大鼠表达水平均高于对照组,且随着低氧暴露时间延长,表达水平逐渐升高(均P<0.05)。结论:(1)高原低氧可导致大鼠胃黏膜组织细胞损伤,且随着低氧作用时间延长程度逐渐加重;(2)高原低氧可诱导胃黏膜组织细胞自噬水平增加;(3)高原低氧可能通过升高细胞自噬水平导致胃黏膜组织细胞损伤。
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