Charcot-Marie-Tooth(CMT)病是神经系统常见的遗传性疾病之一，发病率为1/2,500～1/10,000。其临床特点为：对称性肢体远端肌肉萎缩，慢性进行性力弱及弓形足畸形，无或仅有轻微的感觉障碍。根据电生理和病理改变将其分为CMT1(脱髓鞘型)和CMT2(轴索型)。连锁分析证明CMT是遗传异质性疾病，目前，已发现至少30个基因座位与不同类型的CMT相关，而且18型已明确了致病基因，但发病率最高的是：常染色体显性遗传的CMT1A，致病基因是位于17p11.2-12的周围髓鞘结构蛋白22(PMP22)，其基因重复或点突变可导致CMT1A，占CMT1病人的70％以上；其次为CMTX1，发病率占CMT1病人的5-10％，致病基因为位于Xq13的间隙连接蛋白32(Connexin32，Cx32)，其点突变产生CMTX1。 我们已先后建立起短串联重复序列分析(STR)和PCR酶切法检测特异性融合片段来诊断CMT1A基因重复。STR结合银染的方法因有便宜、省时和所需DNA数量少等优点曾被广泛应用，但主要缺点是受杂合率的限制，如果被检测者为纯合子，则无法得出结论；再者，实验结果不稳定，银染重复性不理想。而PCR酶切法的阳性率较低。因此，为提高基因重复检测的阳性率，并适于在临床应用，本研究分为二部分： 第一部分:实时荧光定量PCR检测腓骨肌萎缩症1A型基因重复 实时荧光定量PCR技术是在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过不同的定量方法对未知模板进行定量分析的方法。本研究首次以SYBR荧光染料为标记物，采用标准曲线的相对定量方法检测了20名正常对照、18名基因重复的患者PMP22基因相对内源参照物人血浆白蛋白(ALB)基因量的变化，每个样品重复3次。18名患者的基因重复均是用STR分析结合PCR-双酶切法检测的。结果发现，完成一个检测过程仅需要2个小时，不需PCR后的电泳过程，一次可检测30个样本；在正常对照组，PMP22比率的变化范围0.83-1.2，而在CMT1A组PMP22重复变化比率为1.3-1.g3，二者之间无重叠，证明该方法快速、敏感、特异而可重复性好。 第二部分:变性高效液相色谱结合混和样品池法检测Connexin32基因突变 DHPLC的原理是通过HPLC在部分变性的条件下将发生错配的异源杂合双链DNA与完全匹配的同源双链DNA分离开来。本研究应用DHPLC结合混合样品池法和DNA序列测定，检测了两个临床可疑CMTX家系中的8名病人和4名无症状携带者及60名正常对照，结果分别在家系1和家系2中发现了Leu89Pro和Gly12Ser点突变，60例家系外正常人中均未发现上述2种改变，提示二者均为致病性突变。 临床方面，家系1中的男女患者都存在明显的遗传异质性，女性患者中Ⅱ3和Ⅲ3无任何临床症状，而Ⅱ9和Ⅱ13确有明显的步态异常，临床受累相对较重。在女性中这种临床表现型的差异被认为与Lyonization(来昂化作用)或X-染色体失活有关。该家系中比较特殊的是Ⅱ4，44岁，男性携带者，至今为止仍无任何临床症状，这在CMTX1家系中罕见，可能与不同种族间差异有关，有待于进一步研究证实。 电生理方面，本研究中，3名男性患者平均正中MNCV为26.8m/s，略高于我们以往研究的CMT1A基因重复者平均正中MNCV23.19m/s。家系2所检病人中MNCV下降，伴正常的CMAPs；而降低的CMAPs伴有严重降低的MNCVs；未见CMAPs下降而MNCVs正常者；同样，降低的SNAPs伴有严重降低的SNCVs；未见SNAPs下降而SNCVs正常者。这些结果共同提示Gly12Ser引起了原发性脱髓鞘过程。