重症肌无力患者体内Th17细胞和调节性T细胞分析

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背景重症肌无力(myasthenia gravis, MG)是神经系统常见的自身免疫性疾病,神经肌肉接头处传导障碍是其特征。T细胞依赖、乙酰胆碱受体抗体(acetylcholine receptor antibody, AchR-ab)介导是本病的主要原因。然而,研究发现细胞免疫与MG致病也有密切联系。新近发现的Th17细胞和调节性T细胞更是参与了多种自身免疫性疾病的起病和病情进展,它们在MG致病机制中所起到的作用值得探讨。第一部分:重症肌无力患者外周血Th17和调节性T细胞分析目的研究重症肌无力患者Th17细胞和调节性T细胞的水平,并研究甲强龙冲击治疗对其影响。方法应用四色流式细胞仪检测66例MG患者及35例健康对照者外周血Th17细胞和CD4+CD25highT细胞百分率;分析其中18例患者外周血Th17细胞和MGFA评分相关性;观察8例MG患者甲强龙冲击治疗2周后上述细胞的变化。结果MG患者与健康对照者外周血Th17细胞百分率分别为2.61±0.28%与0.94±0.12%, p=0.0001;甲强龙治疗前后MG患者Th17细胞百分率为4.72±1.21%与1.81±0.69%, p=0.046,均有统计学差异;患者外周Th17细胞和MGFA评分呈正相关(r=0.5359,p=0.0219)。结论MG患者外周血中Th17细胞升高,甲强龙冲击治疗可降低其水平,并可能是改善MG患者病情的重要机制。第二部分:伴胸腺异常的重症肌无力患者体内Th17细胞和调节性T细胞分析目的研究伴胸腺异常MG患者体内Th17细胞和调节性T细胞的水平,并探讨胸腺切除对其影响。方法应用四色流式细胞仪检测28例胸腺正常MG患者和27例伴胸腺异常MG患者外周血Thl7细胞和CD4+CD25highT细胞百分率;比较其中17例伴胸腺瘤MG患者与10例胸腺增生MG患者外周血Th17细胞和CD4+CD25highT细胞百分率;观察其中8例MG患者胸腺切除一周前后Thl7细胞和CD4+CD25highT细胞的变化。结果伴胸腺异常MG患者外周血中Th17细胞比率为6.50±0.52%,高于胸腺正常MG患者(2.95±0.31%,p=0.0352),伴胸腺异常MG患者外周血中CD4+CD25highT细胞低于胸腺正常MG患者(3.86±0.49%,5.87±0.69%, p=0.0336);伴胸腺瘤患者外周血Th17细胞为7.75±1.10%,胸腺增生MG患者为4.00±1.47%,伴胸腺瘤组显著升高(p=0.0117);而前者外周血CD4+CD25highT细胞百分率4.41±0.66%,后者为3.13±0.84%,两组比较无统计学差异(p=0.1813);伴胸腺瘤患者胸腺组织中Th17细胞高于胸腺增生患者,而CD4+CD25highT细胞则差别不大;胸腺切除前后MG患者外周血Th17细胞未见明显变化,CD4+CD25highT细胞则出现下降趋势。结论伴胸腺异常MG患者外周血Thl7细胞高于胸腺正常MG患者,CD4+CD25highT细胞则低于胸腺正常MG患者;与胸腺增生MG患者相比,伴胸腺瘤MG患者体内Th17细胞更高。提示MG患者胸腺的异常参与了Th17细胞和CD4+CD25highT细胞之间的失衡,从而加剧了MG的起病和进展。第三部分:重症肌无力患者血清Th1、Th2、Th17和调节性T细胞相关细胞因子检测目的研究重症肌无力患者血清中IL-2、IL-10、IL-12、IL-17、TGF-β水平及相互作用。方法应用酶联免疫吸附(ELISA)法检测72例MG患者及35例健康对照者血清IL-2、IL-10、IL-12、IL-17、TGF-β水平,并比较33例眼肌型MG患者和39例全身型MG患者血清上述细胞因子差别。结果MG患者血清中IL-17水平为418.41±55.17pg/ml,高于健康对照(208.66±41.01pg/ml,p=0.0275);眼肌型MG患者与全身型MG患者血清IL-17水平分别为371.25±90.88pg/ml和718.38±87.92pg/ml,全身型患者高于眼肌型患者(p=0.0274);MG患者血清中TGF-p水平低于健康对照(10.53±0.90pg/ml和12.51±0.96pg/ml, p=0.0314),眼肌型患者与全身型患者血清TGF-β浓度分别为9.14±1.38pg/ml,9.73±1.41pg/ml,比较后未见统计学差异(p=0.626);与健康对照相比,MG患者血清IL-2、IL-10、IL-12水平未见统计学差异。结论MG患者血清IL-17浓度高于健康对照,而全身型患者血清中IL-17水平更高,提示IL-17的升高参与MG的发病;MG患者血清中TGF-p水平低于健康对照,而IL-2、IL-10、IL-12等细胞因子未见显著差异。结论:1.MG患者体内存在异常升高水平的Th17细胞和IL-17,并与MG病情的严重程度有关。另外MG患者血清中TGF-β水平降低,而IL-2、IL-10、IL-12等细胞因子未见显著差异。升高的Th17细胞和IL-17可能是MG患者自身免疫失衡的关键因素之一。2.伴胸腺异常MG患者体内Th17细胞高于胸腺正常MG患者,相反CD4+CD25highT细胞低于胸腺正常MG患者,提示MG患者胸腺的异常参与了Th17细胞和CD4+CD25highT细胞之间的失衡。3.激素治疗可以降低Th17细胞百分率,改善临床症状,提示Th17细胞可以作为MG临床免疫治疗疗效评价的生物学指标。
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