葛根芩连汤活性成分的肠吸收动力学研究

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1.目的:   中药复方多以口服形式入药,药物在肠道中的吸收是决定药物生物利用度和影响药物发挥治疗作用的关键因素。本研究以葛根芩连汤为例,通过检测组成复方中药的代表性成分葛根素、大豆苷、甘草苷、野黄芩苷、黄芩苷、汉黄芩苷、黄连碱、药根碱、小檗碱、巴马汀含量,研究葛根芩连汤全方及不同配伍肠道吸收过程中的动态变化规律,借以探寻中药复方的配伍原理及其科学性。   2.方法与结果:   (1)建立葛根芩连汤大鼠肠外翻实验样品的分析方法   样品经过甲醇超声提取后,经色谱条件优化,对葛根素、大豆苷、甘草苷、野黄芩苷、黄芩苷、汉黄芩苷、黄连碱、药根碱、小檗碱、巴马汀等建立了HPLC含量分析方法,结果显示线性关系良好,精密度、稳定性、平均回收率符合要求,方法可行。   (2)葛根芩连汤组方及其配伍的肠外翻吸收研究   采用肠外翻生物模型,考察葛根芩连汤主成分葛根素、大豆苷、甘草苷、野黄芩苷、黄芩苷、汉黄芩苷、黄连碱、药根碱、小檗碱、巴马汀的肠吸收机制,以及不同肠段、药物浓度等因素对它们吸收的影响,比较各组分在全方和不同配伍组给药时的吸收差异。通过单因素方差分析(ANOVA)、多组分两两多重比较对实验结果进行统计分析,结果表明10个活性成分在不同肠段的吸收均为线性吸收,其R2>0.9符合零级吸收速率。其中葛根素、大豆苷、甘草苷、野黄芩苷、药根碱在各肠段的吸收方式除被动扩散外有可能还存在主动转运。在不同剂量时黄芩苷、汉黄芩苷、小檗碱、巴马汀的Ka显示它们为被动吸收。黄连碱在十二指肠的吸收除被动扩散还存在主动转运过程;在空肠、回肠中的吸收表现为主动转运;而在结肠中表现为被动扩散形式。   肠道不同部位的吸收实验表明,葛根素、甘草苷、野黄芩苷在肠道的吸收无特异性吸收部位;大豆苷、小檗碱、巴马汀在空肠中吸收较好,为特异性吸收部位;黄芩苷在药物中浓度时无特异性吸收部位,在药物低、高浓度时回肠吸收最多。回肠为汉黄芩苷的特异性吸收部位;黄连碱、药根碱的特异性吸收部位为结肠。   比较不同配伍的Ka,四个生物碱成分在全方中吸收最好,且其他三个配伍组的吸收没有显著性差异。黄芩苷在全方中吸收最好,葛根芩连组中野黄芩苷、汉黄芩苷在十二指肠、结肠的吸收显著高于其他三个配伍组,全方组、芩连组、芩连甘草组则没有差异;其他肠段则是全方组中的吸收最优。葛根芩连组葛根素、大豆苷的吸收低于全方组中的吸收量。芩连甘草组甘草苷在各肠段中的吸收量显著低于全方组中的吸收量。   (3)葛根芩连汤全方及其配伍的在体肠道灌流吸收研究   采用大鼠在体单向肠灌流模型,考察葛根芩连汤中8种活性成分的肠吸收动力学,并比较葛根芩连汤配伍组中各个代表成分的变化。结果显示,葛根素、甘草苷均为易于吸收药物,大豆苷、黄芩苷、汉黄芩苷、药根碱、小檗碱、巴马汀为中等吸收药物。血浆样品中均能测到以上8种成分。肠道对葛根芩连汤8种活性成分的吸收能力顺序依次为甘草苷、葛根素>大豆苷、汉黄芩苷、小檗碱、黄芩苷>药根碱、巴马汀。比较不同配伍的吸收参数,提示配伍对复方中含量较高的物质葛根素、大豆苷、甘草苷、黄芩苷、汉黄芩苷、药根碱、小檗碱、巴马汀有显著性影响(P<0.05)。   3.结论:   大鼠离体与在体实验表明葛根芩连汤中各活性成分在大鼠肠道均能吸收,葛根素、甘草苷均为易吸收药物,各组分在不同肠段的吸收各有差异。不同配伍组间各组分的肠吸收有所变化,全方中吸收较好。
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