猪囊尾蚴发育过程中可溶性蛋白的变化及其抗原性的分析

来源 :东北农业大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:neithernor86
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猪囊尾蚴病是严重危害养猪业和人类健康的人畜共患寄生虫病。为了筛选出有针对性的早期抗原,为猪囊尾蚴病的早期快速诊断和疫苗的开发奠定基础,本论文应用SDS-PAGE技术首次系统、全面地研究了猪囊尾蚴体内发育过程中全囊虫、头节和囊壁中可溶性蛋白种类和含量的变化规律;并应用免疫印迹技术(Western blot)首次对体内发育不同时期全囊虫、头节和囊壁中可溶性蛋白的抗原性进行了分析,结果如下: 1.首次阐明了猪囊尾蚴体内发育过程中全囊虫可溶性蛋白种类和含量的变化规律。在猪囊尾蚴发育早期全囊虫可溶性蛋白种类和含量较少,分子量也较低;随着发育可溶性蛋白种类由少到多变化明显,中低分子量的蛋白无明显变化,出现了一些高分子量的蛋白带。 2.首次阐明了猪囊尾蚴发育过程中囊壁中可溶性蛋白种类和含量的变化规律。在猪囊尾蚴发育早期囊壁中可溶性蛋白种类较少,大分子可溶性蛋白的含量也相对较少,随着发育囊壁可溶性蛋白种类由少到多明显变化;随着发育,蛋白含量也增加(表现为蛋白带清晰)。 3.首次阐明了猪囊尾蚴发育过程中头节中可溶性蛋白种类和含量的变化规律。发育早期囊尾蚴头节中可溶性蛋白种类较少,发育后期增加,在成熟后基本保持不变。整个发育过程中头节可溶性蛋白都含有分子量为33KDa的蛋白。分子量为44KDa的蛋白只存在于发育后期的猪囊尾蚴头节中。 4.首次对体内发育成熟前后的囊尾蚴头节、囊壁和全囊虫的可溶性蛋白及其抗原性进行了比较研究。未成熟期(感染后19、30、50日)猪囊尾蚴头节、囊壁和全囊虫中的可溶性蛋白种类较少,分子量相对集中在27.5KDa~93KDa范围内,大分子量蛋白较少;成熟期(感染后60、95、105、130日)猪囊尾蚴头节、囊壁和全囊中的可溶性蛋白数量相对稳定,分子量在19KDa~200KDa间变化,同时出现了一些大分子量的蛋白(150KDa~200KDa),随着发育,蛋白种类变化不明显。未成熟期囊尾蚴头节、囊壁和全囊中具有抗原性的可溶性蛋白种类较少,只有3种,其中分子量为78KDa的蛋白可能作为早期诊断抗原;成熟期囊尾蚴的头节、囊壁和全囊中具有抗原性的可溶性蛋白种类较多,有13种,并且出现了一些大分子量蛋白。 5.首次对体内发育同一时期囊尾蚴头节、囊壁和全囊虫的可溶性蛋白及其抗原性进行了比较研究。同一发育时期的猪囊尾蚴,头节、囊壁中的可溶性蛋白变化不明显,大部分相同。在感染后60日,头节、囊壁和全囊虫中的可溶性蛋白种类基本相同,头节只比囊壁和全囊虫多一条蛋白带;在感染后130日,头节与全囊虫蛋白带基本相同,但明显多于囊壁,头节可辨析16条主带,全囊虫为15条主带,而囊壁只有9条主带。表明在成熟期内,同一发育阶段的猪囊尾蚴,头节中的可溶性蛋白种类多于囊壁,但可溶性抗原种类相反,囊壁多于头节,而且可溶性抗原种类差异显著。
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