论文部分内容阅读
IRTKS是国家人类基因组南方研究中心在对脑垂体-下丘脑-肾上腺内分泌系统大规模EST测序过程中电子克隆的一个新基因。本文第一部分对该基因进行了物理克隆，获得了该基因的cDNA，制备了针对其蛋白产物的兔源性多克隆抗体，并对该基因的基本特性和生物学功能进行了初步研究。IRTKS基因定位于染色体7q21.3，全长108310bp，含有14个外显子。该基因有4个转录本(7.4kb，4.6kb，4.0kb，2.2kb)，组织表达谱广，结肠、肝、胎盘等的组织中表达较高，脑组织和白细胞中则很低；细胞表达谱也十分广范。IRTKS蛋白含有511个氨基酸，pI/Mw为8.82/56.924kD，其N端含有IMD结构域，中部含有SH3结构域以及3个脯氨酸富含区。IRTKS蛋白在进化上较为保守，直系同源蛋白可追溯至昆虫。旁系同源蛋白中的IRSp53与其同源性最高(40％)。IRTKS蛋白可发生酪氨酸磷酸化，且可为胰岛素刺激所增强，但IRTKS蛋白不为SUMO1修饰。IRTKS还可与细胞骨架成分Actin相结合并调节F-actin的装配，促进细胞铺展。IRTKS与TP53bp2/ASPP2以及P53可发生相互作用，并且能够影响P53及其靶底物P21的表达。IRTKS在胃肠道肿瘤中表达与在癌旁组织中表达相比有下降趋势。
LZP是本实验室于2003年发现的一个新基因。以往的研究表明LZP是一个含有ZP结构域的蛋白，在肝脏中特异表达(Northern Blot Assay结果)，并且能够分泌进入血液。本文第二部分部分对LZP的生物学功能作了进一步探讨，发现LZP可发生N-糖基化修饰，糖链部分可占到总体的17％。LZP具有链内二硫键，但没检测到链间二硫键的存在。人的LZP在分泌时C-端不发生裂解。LZP分子之间可发生相互作用，但不装配成细丝，而是凝聚成不同大小的球形物。LZP蛋白在小鼠许多组织都能检测到，例如在睾丸的精子细胞，卵巢的黄体细胞，心脏的心肌细胞，肾脏的远曲小管(OCT)的上皮细胞。采用敏感的RT-PCR方法在小鼠的肾脏中还检测到有微量的LZP基因的mRNA表达。LZP蛋白和Tamm-horsfall蛋白在属于远曲小管的亨利氏袢的升枝粗段(TAL)的管腔内皮表面可共定位，并存在相互作用，并且这种相互作用在尿也可检测到。