肺爆震伤大鼠肺泡上皮细胞通透性改变与Claudin4蛋白的表达研究

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目的观察肺爆震伤所致急性肺损伤大鼠肺泡上皮细胞通透性改变与肺泡上皮细胞Claudin4蛋白表达变化的关系。方法将60只SD大鼠随机分为正常对照组(A组)、伤后2h组(B组)、伤后6h组(C组)、伤后12h组(D组)、伤后24h组(E组)共五组,每组12只。利用火药爆炸装置将高压密闭容器中大鼠致伤并建立肺爆震伤大鼠模型,建模成功后,观察大鼠伤后表现,分别于上述时间点处死每组动物6只,取肺组织行HE染色并进行病理组织学观察;再用免疫组化法检测肺组织中Claudin4蛋白的表达;每组另6只动物于处死前半小时经尾静脉注入伊文思蓝,处死前留动脉血,处死后行生理盐水肺泡灌洗,测定肺泡灌洗液与血清的伊文思蓝浓度,二者比值来判定肺泡上皮的通透性;同时用肺干湿比法测定肺含水量。结果肺爆震伤发生后,HE染色可见伤后2小时后肺泡隔明显增厚、部分断裂,其内可见大量炎性细胞渗出,部分聚合成团,肺毛细血管扩张,肺泡腔内有大量液体渗出,部分肺泡腔内可见有少量红细胞聚集,尤以伤后24小时组最明显。伤后6小时后肺组织含水量较伤前明显升高(p<0.05)。肺泡上皮细胞Claudin4蛋白表达在各组间有显著差异,伤后随时间推移逐渐降低(p<0.05)。肺泡上皮通透性,即肺泡与血清伊文思蓝浓度比值于伤后随时间推移逐渐增高(p<0.05)。结论在肺爆震伤所致的急性肺损伤发生后,肺泡上皮细胞Claudin4染色随时间推移下降,说明伤后其表达受到了显著的抑制,但伊文思蓝在肺泡中和血清中的浓度比值随时间推移升高,即肺泡上皮细胞通透性是逐渐增高的。因此,我们的实验能够证实:肺泡上皮细胞的通透性与肺泡上皮细胞的Claudin4蛋白表达存在着负相关关系,在肺爆震伤发生后24小时内,肺泡上皮细胞的Claudin4蛋白的表达随时间推移降低,而肺泡上皮细胞通透性随时间推移增加,说明二者之间可能存在因果关系,Claudin4有减轻急性肺损伤功能。
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