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肝癌是全球排名第六位常见肿瘤,癌症相关的死亡原因中高居第三位。统计显示,仅30%到40%的肝癌诊断时是早期的,20%的肝癌病人能通过手术切除、肝移植或射频消融等治疗方法得到根治性治疗。早期肝癌病人的5年生存率提高到了60%到70%,但是晚期肝癌病人通常因为肝功能损伤、高转移率以及缺乏有效的治疗措施等原因,预后往往很差。因此,迫切需要为晚期肝癌病人寻找新的治疗措施。近年来有研究表明类肝素酶抑制剂有抗血管生成和抑制肿瘤转移的作用。其中两种代表性的药物是磷酸甘露糖戊糖硫酸盐(PI-88)和海洋褐藻寡糖(JG3)。PI-88已经完成了临床I期和II期的试验,显示出了明显的抗肿瘤活性。尽管磺化异麦芽寡聚糖(IMOS)在分子结构上与PI-88相似,但仍存在两个显著的差别,即(?)IMOS由4个磺化异麦芽糖分子构成,其分子量小于1500Da；而PI-88由5个磺化甘露糖组成,分子量为2100-2585Da。这种分子结构的改变或许会改变其抗肿瘤活性。本实验研究,我们初步证明了IMOS能抑制肝癌的生长和转移。1.磺化异麦芽寡聚糖对体外培养人肝癌细胞增殖、凋亡、粘附、迁移及侵袭影响的实验研究目的：探讨IMOS对人肝癌细胞增殖、凋亡、粘附、迁移及侵袭的影响。方法：分别用细胞计数、流式细胞仪、粘附实验、划痕试验及transwell实验来评价IMOS对肝癌细胞增殖、凋亡、粘附、迁移及侵袭的体外作用。结果：在体外,IMOS能显著抑制人肝癌细胞株HCCLM3、HepG2、Bel-7402和HCCLM3-RFP细胞的增殖,并诱导细胞凋亡,也显著抑制了HCCLM3细胞的粘附、迁移和侵袭。结论：IMOS是一种潜在的抗肝癌药物,值得在人肝癌裸鼠移植模型中作进一步的抗肝癌疗效评价。2.磺化异麦芽寡聚糖对人肝癌HCCLM3裸鼠移植瘤生长和转移影响的实验研究目的：探讨IMOS对肝癌细胞株HCCLM3移植瘤生长和转移的影响。方法：用剂量递增腹腔给药的方法,监测(?)IMOS对裸鼠体质量、肝肾功能及重要脏器组织病理学的影响。用活体荧光显微镜,每周动态评价0、30、60、90 mg/kg/dIMOS治疗组裸鼠中HCCLM3肝癌移植瘤的生长。用检测肿瘤的体积及荧光信号来评价IMOS对肝癌生长及转移的作用。结果：在≤90 mg/kg/d剂量下,IMOS对裸鼠无明显毒性,且能显著抑制人肝癌HCCLM3移植瘤的生长和转移。结论：IMOS是一种潜在的抗肝癌药物,值得在肝癌患者尤其是晚期肝癌患者中作进一步的研究。3.磺化异麦芽寡聚糖抑制人肝癌细胞生长与侵袭转移的机制研究目的：磺化异麦芽寡聚糖抑制人肝癌细胞生长与侵袭转移的机制。方法：16mg/mL的IMOS处理HepG2和Hep3B细胞株,设对照组,用Western blotting试验分析细胞的AKT、ERK、JNK、c-MET总蛋白量及AKT、ERK、JNK磷酸化蛋白量。用Supperarray基因芯片,对IMOS剂量组90mg/kg/d和对照组的HCCLM3裸鼠移植肿瘤组织中基因的表达谱进行分析。用定量逆转录PCR (qRT-PCR),对16mg/mL的IMOS剂量组和对照组处理的HepG2和Hep3B细胞基因的表达谱进行分析验证。结果：HepG2和Hep3B细胞株剂量组和对照组相比,pERK, tERK和pJNK在这两种细胞株中均下调,而c-MET仅在HepG2细胞株中显著下调。pAkt, tAkt和tJNK蛋白水平无显著变化。HCCLM3裸鼠移植肿瘤组织剂量组和对照组相比,有10个差异表达的基因。其中,Bcl-2, BIRC/survivin, PCNA, CDK1/CDK2和PRC1均下调了2倍多,而BAI-1,TP73和MDM2均上调了2倍多。IMOS处理HepG2和Hep3B细胞株的基因表达谱,与IMOS处理HCCLM3移植肿瘤的基因表达谱相比,除了RPRM/Reprimo和interferonβ(IFN-β以外,基本相似。结论：IMOS可能通过抑制ERK和JNK的信号通路抑制肝癌的生长和转移。