为找到一种快速准确的隐孢子虫检测方法,本文针对常用的隐孢子虫卵囊分离方法进行了模拟实验比较,结果表明Sheather’s蔗糖漂浮法的浓集效果最好。而对隐孢子虫卵囊的常用检测方法进行比较后发现,最行之有效的是巢式聚合酶链反应(Nested Polymerase Chain Reaction ,Nested-PCR),其具有敏感度高且实用性好的特点。将筛选出的最佳方法应用于东北虎等园养猫科动物和上海市花鸟市场内观赏鸟的隐孢子虫感染情况调查。采用Sheather’s蔗糖漂浮法和改良抗酸染色法镜检187份东北虎粪样和29份其它猫科动物粪样,结果隐孢子虫的平均阳性率分别为1.07%(2/187)、4.81%(9/187)和3.4%(1/29)、6.9%(2/29),经Nested-PCR扩增并未见阳性目的条带。用Sheather’s蔗糖漂浮法结合改良抗酸染色法检查211份观赏鸟粪便样品中有12份检出隐孢子虫,阳性率为5.43%,经Nested-PCR扩增出目的条带后,测序结果显示该隐孢子虫为贝氏隐孢子虫(Crysporidium baileyi)。本文对部分常用的隐孢子虫检测方法及其适用性进行了试验重塑和理论评述,为隐孢子虫病的快速检查提供了参考,同时提供了不同方法在实验室条件下的敏感性参照数据,此数据具有可重复性和实用指导意义。通过对园养东北虎等猫科动物和上海地区观赏鸟类感染隐孢子虫情况的流行病学和分子生物学调查,为进一步掌握园养东北虎等猫科动物和上海地区观赏鸟类隐孢子虫病流行状况及特点奠定了基础,对于进一步防控该病具有重要意义。