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目的:检测未妊娠小鼠、正常妊娠模型小鼠及URSA模型小鼠脾脏CD4+Th17/Treg细胞活化水平及IL-17A、IL-10、IL-21、IL-23细胞因子分泌的变化。探讨CD4+Th17/Treg细胞及相关细胞因子与URSA的关系,为URSA患者制定免疫防治策略提供基础资料。方法:建立URSA小鼠模型(♀CBA/J×♂DBA/2J),实验设未妊娠小鼠(♀CBA/J)和正常妊娠小鼠模型(♀CBA/J×♂Balb/c);用免疫磁珠分选技术(MACS)将三组雌鼠脾脏中的CD4+T细胞分选出来,将分选的CD4+T细胞体外诱导活化为Th17/Treg两个细胞体系,流式细胞术(FCM)检测两个细胞体系的诱导活化情况;通过Luminex x MAP技术检测诱导活化后的细胞培养上清液及蜕膜、胎盘细胞研磨上清中IL-17A、IL-10、IL-21、IL-23的分泌水平。用Western-Blot检测Th17/Treg两细胞体系及母-胎界面的蜕膜、胎盘细胞中IDO、Fox P3蛋白的表达水平。结果:(1)FCM检测未妊娠小鼠、正常妊娠模型小鼠和URSA模型小鼠脾脏中CD4+T细胞来源的Th17细胞的诱导结果分别为(0.32±0.19)%、(0.13±0.06)%、(0.72±0.38)%。URSA组Th17细胞明显高于未妊娠组和正常妊娠组。三组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。三组CD4+CD25+Fox P3+Treg细胞的诱导结果分别为(0.38±0.15)%、(0.85±0.48)%、(0.17±0.12)%。URSA组CD4+CD25+Fox P3+Treg细胞明显低于未妊娠组和正常妊娠组。三组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)Luminex xMAP技术检测小鼠母-胎界面的蜕膜、胎盘细胞研磨上清中的细胞因子分泌水平:正常妊娠组IL-17A(9.90±5.04)pg/ml、IL-10(6.50±7.03)pg/ml、IL-23(14.84±11.41)pg/ml和URSA组IL-17A(14.00±16.73)pg/ml、IL-10(4.10±6.25)pg/ml、IL-23(17.52±16.15)pg/ml。而IL-21细胞因子分泌水平浓度低于检测下限(P>0.05)。三组小鼠诱导后的Th17/Treg细胞上清中的IL-17A、IL-10、IL-21、IL-23细胞因子分泌水平的浓度均低于检测下限。(3)Western Blot检测未妊娠小鼠、正常妊娠模型小鼠和URSA模型小鼠脾脏来源的CD4+T细胞诱导后的Th17/Treg细胞中IDO、Fox P3结果:URSA组IDO、Fox P3的表达均明显低于未妊娠组和正常妊娠组。三组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。URSA组小鼠研磨的蜕膜、胎盘细胞中IDO、Fox P3蛋白表达均显著低于正常妊娠组。两组之间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:(1)URSA小鼠Th17细胞的活化分化增殖与URSA的发生相关,即Th17细胞数量上升不利于妊娠维持;正常妊娠表现为CD4+CD25+Fox P3+Treg细胞偏移现象,在URSA时CD4+CD25+Fox P3+Treg细胞数量降低则不足以维持妊娠。(2)URSA小鼠脾CD4+T细胞活化后分泌IL-17A和IL-23与URSA的发病有关,且两者的增加可能诱使URSA发生;IL-10分泌升高则可维持正常的妊娠。(3)URSA小鼠的蜕膜、胎盘细胞中IDO、FoxP3蛋白表达较正常妊娠组均显著降低,监测URSA患者再孕时早孕期的IDO变化可预测妊娠结局。