低木质素转基因挪威云杉的植株再生及功能基因表达的微阵列检测

来源 :中南林学院 中南林业科技大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:echo_1978
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该项目研究的目的就是采用瑞典农业大学构建的反义ccr基因转导的挪威云杉细胞愈伤组织,通过诱导产生再生植株,并检测证实该基因是否表达及其它相关基因的表达状况,为培育出低木质素的转基因挪威云杉新品种奠定物质和理论基础.以转基因亚系A78-3、A78-4、A78-5和未转基因对照A95∶88∶22的细胞愈伤组织为实验材料,以DKM和LP-M熟化培养基培养五周后,再以1/4SH萌发培养基培养四周,成功地诱导形成了胚胎,并再生成新的小植株,萌发成活率达到80﹪.从继代培养的愈伤组织和再生小植株中分别分离总RNA,经RT-PCR检测反义ccr目标基因的表达情况.结果显示:在愈伤组织和再生小植株中,A78-3和A78-4两个亚系都有很明显的反义带,但A78-5没有出现反义带,从而证实了A78-3和A78-4两个亚系的反义ccr基因已经在愈伤组织和再生小植株中都得到了成功的整合和表达,而A78-5则没有表达.选择384个与木质素生物合成及植物生理代谢和环境适应性有关的基因或cDNA片段构建尼龙芯片膜,并对转基因细胞亚系A78-3、A78-4和A78-5和对照亚系A95∶88∶22等培养再生植株进行基因表达的微阵列检测.
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