【摘 要】
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实验目的探讨γ-Adducin蛋白是否可减轻Aβ1-42纤维诱导的神经元突起损伤,以期为阿尔茨海默病寻找新的治疗靶点。实验方法实验一:培养原代小鼠神经元,用10μmol/L Aβ1-42纤维处理24 h,采用神经元特异性标记物MAP2免疫荧光染色检测神经元突起损伤,用TUNEL染色检测神经元凋亡。实验二:分别用对照病毒GFP-Vector和表达GFP-γ-Adducin的腺相关病毒感染原代小鼠神经
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实验目的探讨γ-Adducin蛋白是否可减轻Aβ1-42纤维诱导的神经元突起损伤,以期为阿尔茨海默病寻找新的治疗靶点。实验方法实验一:培养原代小鼠神经元,用10μmol/L Aβ1-42纤维处理24 h,采用神经元特异性标记物MAP2免疫荧光染色检测神经元突起损伤,用TUNEL染色检测神经元凋亡。实验二:分别用对照病毒GFP-Vector和表达GFP-γ-Adducin的腺相关病毒感染原代小鼠神经元,5 d后再分别加入Aβ1-42纤维处理,用免疫荧光染色观察γ-Adducin蛋白过表达对Aβ1-42纤维引起的神经元突起损伤的影响,用Dil染色检测神经元树突棘密度的变化。实验结果对照组神经元突起生长良好,突起形态连续且完整,而使用10μmol/L Aβ1-42纤维处理后,神经元突起受损,出现断裂,提示Aβ1-42纤维对神经元突起具有损伤作用。TUNEL染色发现Aβ1-42纤维处理可以引起神经元凋亡。为了进一步明确γ-Adducin对神经元突起生长形态和凋亡的影响,我们利用腺相关病毒载体在神经元中分别过表达GFP-Vector和GFP-γ-Adducin,然后使用Aβ1-42纤维处理,发现GFP-γ-Adducin处理组比GFP-Vector对照组神经元突起损伤减少,同时神经元凋亡率显著降低。Dil染色检测到过表达γ-Adducin的神经元树突棘密度明显高于对照组。实验结论γ-Adducin蛋白可减轻Aβ1-42纤维导致的神经元突起损伤,其机制可能与神经元突起生长信号通路有关,γ-Adducin可能是一个新的阿尔茨海默病治疗靶点。
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