【摘 要】
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目的:研究认为,血管内皮细胞凋亡是动脉粥样硬化的始动因素和中心环节,而高血糖又是糖尿病动脉粥样硬化等大血管病变的高危因素,然而目前糖尿病并发动脉粥样硬化相关机制尚未
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目的:研究认为,血管内皮细胞凋亡是动脉粥样硬化的始动因素和中心环节,而高血糖又是糖尿病动脉粥样硬化等大血管病变的高危因素,然而目前糖尿病并发动脉粥样硬化相关机制尚未完全阐明,该研究的目的是了解高浓度葡萄糖(high concentrations of glucose,HG)对血管内皮细胞凋亡和增殖的影响并探讨其可能的分子生物学机制.方法:体外培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC),实验性模拟糖尿病的HG状态,随机分为三组:正常对照组(NG 5.5,含Glu5.5mmol/L)、实验组HG 20组(含Glu20mmol/L)、HG 40组(含Glu40mmol/L).倒置显微镜、透射电镜观察细胞形态学改变;噻唑蓝比色法(MTT法)测定细胞生长曲线和细胞活力的变化;流式细胞术检测细胞凋亡、细胞周期及调控蛋白—增殖性细胞核抗原(the proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)及凋亡相关基因Fas和Bcl-2的表达.结果:1.HG对HUVEC形态学的影响.2.HG对HUVEC增殖的影响.3.HG对HUVEC细胞周期的影响.4.HG对HUVEC凋亡的影响.5.HG对HUVEC PCNA、Cyclin D1、Fas及Bcl-2蛋白表达的影响.结论:1.HG可诱导体外培养的HUVEC凋亡,同时抑制了HUVEC的增殖.2.HG可改变HUVEC细胞周期的分布,延缓Go-G1期向S期过渡,使细胞阻滞于G<,1>期.3.HG明显下调HUVEC的PCNA表达,提示HG可能通过下调PCNA来抑制HUVEC的增殖.4.HG培养HUVEC后CyclinD1表达明显下降,并表现出典型的细胞周期被阻滞在G<,1>期的现象,说明Cyclin D1可能参与G<,1>期阻滞的调控.5.促调亡基因Fas表达上调及抑凋亡基因Bcl-2表达下调可能参与HG诱导HUVEC凋亡的基因调控.
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