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目的:
1.在建立家兔真菌性角膜溃疡动物模型的基础上,对左眼角膜病灶行局部冷冻术,然后通过扫描电镜,透射电镜观察其真菌的超微结构改变,为真菌性角膜溃疡的冷冻治疗提供可靠理论依据;
2.通过共焦显微镜对真菌性角膜溃疡的动物模型(实验组和对照组)进行连续性动态观察,从而判断疗效,为临床真菌性角膜溃疡的治疗调整提供客观依据。
方法:
1.在建立家兔真菌性角膜溃疡动物模型的基础上,将其细分三类(镰刀菌组,烟曲霉菌组,白色念球菌组),在各类中各分为三度:轻度,中度,重度。
2.组内进行随机分组,分别归入对照组(药物治疗),实验组(真菌溃疡角膜病灶冷冻术+药物治疗)。
3.在冷冻术前以及冷冻术后1天,分别处死3只白兔,然后应用透射电镜,扫描电镜对病灶真菌进行超微结构观察。
4.用裂隙灯、共焦显微镜对其病程(7天,15天,30天)进行连续动态观察,评价疗效。
结果:
1.在冷冻前后,通过用扫描电镜和透射电镜对真菌胞体或菌丝进行超微结构观察:
(1)扫描电镜结果:
冷冻前:真菌细胞壁及细胞膜结构完整,电子密度极高,均匀一致。
冷冻后:真菌菌体膨胀或萎缩,形状不规则,细胞壁及细胞膜断裂,
核心溶解,菌体近似空壳,菌丝断裂变细。
(2)透射电镜结果:
冷冻前:真菌胞体呈圆形或类圆形,细胞壁及细胞膜连续完整,胞内可见细胞核及核仁,核膜连续完整,胞质内隐约可见线粒体,内质网等细胞器。
冷冻后:真菌胞体不规则椭圆形,细胞壁及细胞膜膨胀缺失,细胞核破裂,细胞器溶解,胞质成碎渣样。
2.共焦显微镜对其病程和疗效分别进行连续动态观察:
(1)实验组:病程明显缩短:(即兔眼真菌性角膜溃疡95.5%的平均愈合时间:(X±2s)
对照组:28.66±7.01天。
实验组:13.75±4.30天。
(2)实验组:疗效明显提高:
对照组:其平均有效率为34.5%。
实验组:有效率为74%。
经卡方检验证明:P2=6.63,P<0.01,实验组效果显著。
结论:
角膜病灶局部冷冻术治疗家兔真菌角膜溃疡疗效显著(即比单纯药物治疗效果好)。根据真菌种类不同,其疗效也不同:
白色念球菌疗效最好,镰刀菌次之,烟曲霉菌较差。