脑胶质瘤是原发性恶性脑肿瘤中最常见的一类肿瘤,其具有较差的预后性和高致死率。尽管包括手术、化疗及放疗在内的综合治疗水平在不断提高,但由于胶质瘤细胞的高度侵袭性导致治疗结果仍未得到明显改善,病人常常在治疗后很短时间内发生复发。近年来在肿瘤发生的领域提出了一个新的理论,即肿瘤干细胞理论。这个理论认为,肿瘤干细胞是肿瘤中具有自我更新、无限增殖及分化潜能的细胞,这部分细胞虽然只占少部分,但却是肿瘤发生、发展的关键。本研究主要探讨了利用化疗药物秋水仙素分离大鼠胶质瘤细胞中的干细胞样肿瘤细胞(Stem-like Cancer Cell,SLCC)的可行性,负载胶质瘤SLCC的树突状细胞疫苗在体外对肿瘤细胞的杀伤能力,以及对秋水仙素处理胶质瘤细胞的基因组不稳定性的初步探索。　　 C6大鼠胶质瘤细胞经不同剂量水平(0、0.5、1.0、2.0μg/ml)的秋水仙素处理后,大部分细胞发生凋亡,剩下存活的细胞经过免疫荧光染色发现其表达干细胞标志分子Nestin,提示可能是SLCC。流式和RT-PCR实验表明,经过秋水仙素处理后的存活的C6细胞表达干细胞标志分子nestin,sox2和bmil,并且其数量随着秋水仙素浓度的增加而增加。　　 树突状疫苗是一种脑肿瘤的生物治疗方法。本实验通过分离大鼠的树突状细胞和淋巴细胞,体外培养并用经不同剂量组处理分离的SLCC全蛋白刺激一周后,使用MTT法检测激活的细胞毒T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)体外对肿瘤细胞的杀伤效果。结果表明,经药物分离的SLCC组诱导的CTL效果明显大于对照组,提示脑胶质瘤SLCC可以作为树突状疫苗免疫治疗的新靶点。　　 此外RT-PCR证明经秋水仙素处理后的胶质瘤细胞中mad2水平明显升高,表明化疗药物可能增加了肿瘤细胞中基因组不稳定性,从而导致SLCC的聚集。　　 综上,本实验证明了利用化疗药物秋水仙素可以分离大鼠胶质瘤细胞C6中的SLCC细胞,且该分离可能与肿瘤细胞基因组不稳定性提高有关。同时,利用负载SLCC全蛋白的树突状细胞激活的T淋巴细胞在体外具备比对照组更强的细胞杀伤能力。这些结果为以脑胶质瘤SLCC最为靶点的免疫治疗方法开发提供了基础依据。