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鱼类精液的超低温保存在鱼类养殖、遗传育种以及种质资源保存都具有重要的意义。鱼类精液的超低温保存可以使种质的长距离运输得以实现,同时有利于鱼类的杂交、选育、优良的形状的获得以及基因多样性的保护,而且鱼类精液冷冻库的建立可以为水产养殖业和试验生物学研究长期稳定地提供材料。自从50年前Blaxter成功冷冻保存大西洋鲱鱼精巢以来,鱼类精液的超低温保存取得很大的进展。目前已经有200多种淡水鱼类的精液,40多种海水鱼类的精液成功的获得保存,然而对于所有的硬骨鱼类的精液的超低温保存还没有得到一个统一的方法,鱼类精液的超低温保存技术有待于进一步的发展。 真鲷为我国、日本及韩国重要海水养殖鱼种,具有较高地经济价值,然而最近几年,由于过渡捕捞、海洋污染、以及栖息环境的改变导致真鲷资源量下降,因此,建立真鲷精液超低温保存的可靠方法对海水养殖业的发展以及生物多样性的保护具有重要意义。 本文采用2-mL的冷存管和程序降温法超低温保存真鲷精液。共实验了六种稀释液(Cortland、Hank’s balanced salt solution、Modified Mounib’s medium、 Mounib’s medium、Mounib’s NaCl medium、Ringer),六种抗冻剂(二甲基亚砜、二甲基乙酰胺、丙二醇、乙二醇、甲醇、甘油),四种降温速率(10、20、30、40℃/min),和三种解冻温度(35、40、45℃)对真鲷精液超低温保存效果的影响。将超低温保存前后精子的活动率,受精率和孵化率的变化作为筛选真鲷精液超低温保存方法的指标。试验结果表明,采用Cortland作为稀释液,15%—20%二甲基亚砜,9%和12%乙二醇,20℃/min的降温速率对精液进行超低温保存,液氮保存1周后,40℃水浴解冻,获得理想的活动率(79.4±4.7 to 88.6±8.0%),受精率(89.6±2.9 to 95.6±1.9%)以及孵化率(85.3%±5.1%to 91.4±4.3%),