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前言 脑血管病是危害人类的三大疾病之一，而且其预后不良。所以脑血管病的治疗和诊断成为研究的重点。基因治疗成为比较有发展前景的方法之一，基因治疗是采用有效的载体，如质粒，病毒等将目的基因cDNA导入脑血管，脑室或周围组织，并表达有利于血管成长，或抗细胞凋亡，或抗脑损伤的物质，因而产生保护作用。而且缺血性脑血管病的治疗主要是保护缺血半暗带，防止其进一步损伤，缺血半暗带的细胞死亡方式主要是凋亡，所以抗凋亡成为治疗主要方向之一。Bcl-2基因已证实是重要的抗凋亡基因。故我们使用Bcl-2基因作为治疗基因，以质粒为载体，脑室注射方式，来治疗大鼠缺血性脑血管病。 材料和方法 取135只Wistar大鼠，随机分配到3组中，每组45只，对照组为脑室注射生理盐水和空质粒二组，治疗组为脑室注射质粒pLXSN介导Bcl-2基因。改良线栓法制备短暂缺血2小时的MCAO(middle cerebral occlusion)模型，脑梗塞后进行脑室注射质粒pLXSN介导Bcl-2基因20ul，每组分别取梗塞后3，6，24，48，72小时为时间点。分别TTC染色观察梗塞体积变化，及免疫组化测定BCL-2和BDNF(Brain Derived Neurotrophic Factor)的表达。 结果 MCAO后24，48，72小时，梗塞体积治疗组显著小于对照组(p＜0.05)；3和6小时无显著变化(p>0.05)。MCAO后24，48，72小时，治疗组Bel-2和BDNF的表达比对照组显著增加(p<0.01);3，6小时无显著改变(p>0 .05)。讨论 我们的研究发现Bd一2基因的使用可以对脑缺血的神经元具有保护作用，减小梗塞体积;而且可以使脑皮质BDNF的表达增加。我们的研究显示，生理盐水组与空质粒组相比，各时间点Bcl一2表达均无增加。与生理盐水组，空质粒组相比，治疗组的Bcl一2表达在梗塞后3，6小时增加不显著，在梗塞后24，48，72小时大鼠脑皮质的Bcl一2表达显著增加;而且与以前研究显示的梗塞后Bcl一2表达高峰是6小时不同，其表达高峰是24小时。这表明质粒pixSN介导Bcl一2基因转人鼠脑内确实可增加Bcl一2基因在鼠脑内的表达，并使表达高峰延迟，从而发挥其抗凋亡作用。在梗塞后3，6小时增加不显著，可能是由于转人基因表达需要一定时间。 我们再观察Bcl一2的治疗对梗塞体积的影响。结果显示大鼠的梗塞体积生理盐水组和空质粒组相比无显著差异，说明空质粒与生理盐水一样，对大鼠无毒害副作用，也没有治疗作用。Bcl一2组与对照组相比，3小时，6小时的梗塞体积无差别，可能是由于Bcl一2的表达尚未增加，未显示治疗作用。24，48和72小时的梗塞体积比对照组显著减小，证实Bd一2基因脑室注射对梗塞后大鼠的缺血损伤具有保护作用。结论 本研究证明脑室注射质粒pLXSN介导Bd一2基因对短暂脑缺血有治疗作用，并可增加BDNF表达。上调BDNF表达所起的神经保护作用可能是短暂脑缺血后的Bcl一2的治疗作用机制之一。