【摘 要】
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大熊猫是中国的国宝,对其保护愈来愈受到相关部门和公众的重视.患病死亡是大熊猫数量减少、种群濒危的一个重要原因,而在致死大熊猫的各种疾病中,以肠道疾病最为严重.该论文
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大熊猫是中国的国宝,对其保护愈来愈受到相关部门和公众的重视.患病死亡是大熊猫数量减少、种群濒危的一个重要原因,而在致死大熊猫的各种疾病中,以肠道疾病最为严重.该论文旨在建立一套基于非损伤粪便取样应用PCR基因诊断技术对其主要肠道致病菌肺炎克雷伯氏杆菌和小肠结肠炎耶尔森氏菌进行检测的方法.影响PCR扩增结果的因素十分复杂,该论文在优化扩增条件时采用了常规方法(单因素优化法)和正交实验法两种方法,结果表明按传统的单因素实验的方法进行搜索,不仅工作量大,实验时间长,而且很难找出反应的最适宜的参数组合.而正交实验法却简便有效,其优化的两种病原菌最优扩增条件具有扩增条带清晰、实验条件粗放等特性.实验证明正交实验法高效、快速、科学性强,是PCR反应条件优化中值得推广使用的有效方法.复合PCR技术也称多重PCR技术(简称M-PCR),它是用几对引物在同一个PCR系统中进行扩增,这样可以同时扩增出几个不同专一靶区域于多重感染的诊断.该论文在单一PCR体系的基础上也对复合PCR体系进行了研究.该论文建立了一套系统的基于粪便样品的大熊猫肠道致病菌的基因检测技术,为大熊猫及其它野生动物的胃肠道疾病的诊断提供了一种快速、准确的平台技术,具有广阔的临床应用前景.
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