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目的:制备小鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)，观察其在体外对小鼠乳腺癌细胞（EMT-6）生长、凋亡及致瘤性的影响;将BMSC联合白细胞介素-12真核表达质粒（pcDNA6/IL-12）于乳腺癌荷瘤小鼠瘤体内共同注射，探讨二者联合应用对荷瘤小鼠的治疗作用。 方法:(1)小鼠BMSC的原代培养及其鉴定:采用差速全骨髓贴壁法培养原代小鼠BMSC，采用形态学和成骨诱导茜素红染色钙结节法对其鉴定。(2)制备BMSC条件培养基，分别配置成(25％，50％，75％，100％)四种不同浓度。作用EMT-6细胞24，48，72 h后，CCK-8法检测在不同浓度BMSC条件培养基的作用下，EMT-6细胞增殖的情况;流式细胞术(Annexin V-FITC/7-AAD双染色法)检测在BMSC条件培养基培养条件下EMT-6细胞凋亡的情况。(3) BMSC条件培养基处理过的EMT-6细胞接种昆明种小鼠，于第4、6、8、10、12、14、16 d测量肿瘤的大小。第17 d处死小鼠，取出小鼠肿瘤并称重，将肿瘤组织制作成石蜡切片，用苏木精-伊红(HE)染色及病理学观察。(4)建立小鼠乳腺癌荷瘤模型，待肿瘤直径达到5-8 mm（约4d）将小鼠随机分为4组。分别为阴性对照组（瘤内注射PBS）;BMSC组(瘤内注射BMSC);IL-12组（瘤内注射pcDNA6/IL-12质粒）;BMSC联合IL-12组（瘤内注射BMSC和pcDNA6/IL-12质粒）。观察小鼠肿瘤的生长情况，每隔两天测量肿瘤的长短径，计算肿瘤的大小。第17d处死小鼠，无菌条件下剥取瘤体和脾脏并称质量，计算脾指数和抑瘤率。MTT法检测脾淋巴细胞的增殖活性，LDH法检测脾淋巴细胞的杀伤活性，HE染色观察肿瘤组织的病理学改变。 结果:(1)成功培养小鼠BMSC，取P3代细胞进行成骨诱导，茜素红染色钙结节为阳性。(2)随着BMSC条件培养基浓度的升高以及作用时间的延长，EMT-6细胞的增殖抑制率由（6.8±0.02）％上升到（29.8±0.05）％，凋亡率由（2.3±0.2）％上升到（25.4±0.3）％。(3) BMSC条件培养基处理的EMT-6细胞致瘤性明显减弱，肿瘤的体积明显变小(P＜0.05)。组织病理学观察可见实验组肿瘤组织大片坏死。(4) BMSC单独应用及其与pcDNA6/IL-12联合应用可导致荷瘤小鼠肿瘤的体积缩小(P＜0.01)，脾淋巴细胞增生反应及杀伤活性增强(P＜0.05)。肿瘤坏死区扩大并且有大量炎性细胞浸润。结果显示BMSC联合pcDNA6/IL-12应用可显著提高实验小鼠抗肿瘤细胞免疫力，获得更好的治疗效果。 结论:本研究成功制备出了小鼠BMSC细胞。体内外研究证明，BMSC对小鼠乳腺癌细胞EMT-6具有抑制增殖、促进凋亡及降低其致瘤性作用。BMSC与质粒pcDNA6/IL-12联合应用增强小鼠的抗肿瘤细胞免疫力，发挥更强的抗肿瘤作用。