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鸡的肿瘤性疾病包括马立克氏病(Mareks disease，MD)、禽白血病(Avain leukosis，AL)和网状内皮组织增殖病(Reticuloendotheliosis，RE)，分别是由马立克氏病病毒(Mareks disease virus，MDV)、禽白血病病毒(Axian leukosis virus，ALV)和网状内皮组织增殖病病毒(Reticuloendotheliosis virus，REV)引起。肿瘤病的发生一方面可以引起鸡的肿瘤而死亡；另一方面可以引起鸡的免疫功能受到损害，导致免疫抑制，使鸡的抵抗力下降，从而并发或继发其他感染，使生产性能下降甚至死亡。当前，这三种病在我国养鸡场中都有不同程度的存在，并具有相似的临床症状，临床上易于混淆。疾病鉴别诊断是疾病控制的前提。本研究主要用原位杂交对三种肿瘤病进行鉴别诊断，并对其相关基因的序列进行测序和分析，主要内容及结果报告如下：
1.根据GeneBank中MDV、ALV-J和REV基因序列，设计并合成三对引物，对保存的阳性病料进行扩增，并经测序确定其特异性。然后将PCR产物亚克隆到pSPT18，经DIG标记得到针对三种肿瘤病的特异cRNA探针。
2.将收集的病料制成石蜡切片，和以前保存的切片一起，加入特异性探针进行原位杂交，结果在切片上可以看到清楚的阳性信号。对32份疑似肿瘤病料进行检测，结合切片HE染色，发现MDV阳性率为25.00％(8/32)，ALV-J阳性率为18.75％(6/32)，REV阳性率为3.13％(1/32)。
3.根据GeneBank中MDV、ALV-J和REV基因序列，设计出MDV meq基因的特异引物和ALV、REV env基因的引物，将扩增出的基因克隆入pMD18-T载体筛选阳性克隆进行测序，并将测序结果和国内外发表毒株进行序列比对分析。结果表明，所测MDVmeq 1020个碱基，编码340个氨基酸；其核苷酸与参考毒株间同源性在98.6％～99.8％之间，氨基酸同源性在96.5％～99.4％之间。本研究序列亲缘关系很近，同源性在99.5％～99.6％之间。与0095亲缘关系较近，与GA、648和N亲缘关系较远。
所测ALV-J gp85有921个碱基，编码307个氨基酸，其核苷酸与参考毒株同源性在86.8％～97.5％之间；gp37有591个碱基，编码197个氨基酸，其核苷酸与参考毒株同源性在93.7％～98.3％之间。gp85推导氨基酸同源性在84.0％～95.4％之间，gp37推导氨基酸同源性在89.8％～98.0％之间。本研究序列亲缘关系较近，同源性在94.4％～98.7之间。与GD06SL1和GD06SL2亲缘关系较近，与ADOL-7501亲缘关系较远。
所测的REV部分env序列有477个碱基，编码159个氨基酸，此部分env同源性在94.3％～100％之间，其推导氨基酸同源性在87.3％～100％之间。本研究毒株和APC-566亲缘关系较近，与SNV亲缘关系较远。
本研究建立了原位杂交技术检测鸡三种肿瘤性疾病的方法，并进行了初步应用，对几份病料中MDV、ALV-J和REV的相关基因遗传变异性做了分析，为肿瘤病的诊断和防治提供了新的方法和资料。