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研究背景和目的:卵巢恶性肿瘤是妇科常见肿瘤。由于卵巢癌早期不易发现,患者就诊时往往已处于病变晚期或有远处转移。80 %以上的卵巢恶性肿瘤为上皮性癌,来源于卵巢上皮。卵巢癌发病机制并未完全清楚,但炎症反应是其发生的重要因素之一。盆腔炎和子宫内膜异位等慢性炎症的刺激均可增加卵巢癌的发病风险;排卵和排卵后卵巢上皮的修复都有部分炎症介质的参与,有可能引起上皮细胞的异常增生。有研究报道口服避孕药或妊娠等通过减少排卵量而降低卵巢癌的发病风险;也有报道保留卵巢的子宫切除术和输卵管切除术因可减少局部炎症反应而降低卵巢癌的发病风险。环氧合酶(Cyclooxygenase, COX)是一类与前列腺素合成有关的酶,是花生四烯酸转化为前列腺素前体-前列腺素H2的限速酶,而前列腺素是一类重要的炎症介质。COX-1和COX-2是COX的一对同功酶,也是目前COX家族中研究最多的两种酶。一度认COX-2催化合成的前列腺素参与炎症反应,而COX-1不直接参与炎症,但近年大量研究报道COX-1不仅参与炎症,并有加重炎症的作用。COX亚型在卵巢癌中的表达及作用仍存在一定争议。有研究发现COX-2的表达可促进卵巢癌细胞增殖、血管生成、抑制凋亡和转移;大量的研究还发现COX-2与卵巢癌铂类化疗药物耐药有关。而COX-1长期被人们认为是一种结构型酶,其作用主要是在多数组织微量恒定表达,维持机体正常生理功能,但近年有研究报道COX-1在卵巢癌中表达上调且可促进肿瘤血管生成。由于COX-2易受机体内外环境因素的刺激诱导性表达,有研究发现在没有接受过细胞减灭治疗的卵巢癌患者表现为COX-1表达上调而不是COX-2,因此COX-1可能也是卵巢癌的一种肿瘤标志物。COX的表达可促进肿瘤细胞增殖、血管生成和抑制凋亡等,抑制这些调节途径有望达到治疗疗效。COX抑制剂是一类广泛应用于临床的药物,其最初用于抗炎症治疗,如阿斯匹林,布洛芬等,是一类经典的非甾体类消炎药。研究发现非甾体类消炎药(non-steroidal anti-inflammatory drugs,NSAIDs)可降低某些肿瘤的发病风险,如规范使用NSAIDs 10-15年可降低结直肠癌发病风险40 %-50 %。以COX调节途径为作用靶点的药物可能开辟肿瘤治疗的新途径。本课题以卵巢上皮性癌细胞株SKOV-3和OVCAR-3为代表,研究COX-1和COX-2在卵巢癌细胞中的表达情况以及使用特异性COX-1抑制剂SC-560和特异性COX-2抑制剂NS-398对卵巢癌细胞生物学特性的影响。方法:1.Western blot法检测COX-1和COX-2在卵巢癌细胞SKOV-3和OVCAR-3中的表达;2. MTT法检测不同浓度的SC-560和NS-398处理卵巢癌细胞后对细胞增殖的影响;3.流式细胞仪检测SC-560和NS-398处理卵巢癌细胞后对细胞增殖周期的影响;4. ELISA检测SC-560和NS-398处理卵巢癌细胞后对细胞PGE2合成的影响;结果:1.COX-1和COX-2在卵巢癌细胞中的表达COX-1在SKOV-3和OVCAR-3两株细胞均呈阳性表达,而COX-2只在OVCAR-3细胞中呈阳性表达。2.不同浓度的SC-560和NS-398对卵巢癌细胞增殖的影响SC-560和NS-398对卵巢癌细胞生长均有抑制作用。其中SC-560对OVCAR-3细胞的生长抑制强于SKOV-3细胞。50μmol/L的SC-560在24 h即可对OVCAR-3细胞的生长产生抑制作用,而对SKOV-3细胞的生长抑制作用表现在48 h后,所需药物浓度也较OVCAR-3细胞大,50μmol/L对SKOV-3细胞无增殖抑制作用;作用时间24 h和48 h,NS-398对OVCAR-3细胞无生长抑制,72 h时可表现明显细胞增殖抑制,而对SKOV-3细胞的生长抑制起效于48 h,所需药物浓度较大,50μmol/L对细胞增殖无抑制。在相同浓度作用时间相同时SC-560对细胞的生长抑制作用强于NS-398。3.不同浓度的SC-560和NS-398对卵巢癌细胞增殖周期的影响SC-560和NS-398对SKOV-3和OVCAR-3细胞增殖周期无显著影响(P>0.05),但能促进肿瘤细胞凋亡。4. SC-560和NS-398对卵巢癌细胞PGE2合成的影响SC-560和NS-398均能减少卵巢癌细胞PGE2的合成。结论:1. COX-1在两株卵巢上皮性癌细胞中均有阳性表达,而COX-2仅在OVCAR-3细胞中呈阳性表达。提示二者可能有不同的表达调节途径。COX-1和COX-2与卵巢癌发生发展的关系有待进一步研究。2.特异性COX-1抑制剂SC-560和特异性的COX-2抑制剂NS-398对卵巢癌细胞生长均有抑制作用,但在相同浓度、作用时间相同时SC-560对细胞的生长抑制作用强于NS-398。SC-560和NS-398对细胞生长周期无明显影响,但能加速细胞的凋亡,提示SC-560和NS-398可能通过调节凋亡途径抑制肿瘤细胞的生长。3. SC-560和NS-398能减少卵巢癌细胞PGE2的合成环氧合酶与卵巢癌的发生发展有密切关系,环氧合酶抑制剂可能成为卵巢癌治疗的新途径。