滋阴明目丸对视网膜光损伤大鼠外核层厚度及凋亡指数的影响

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目的:通过建立视网膜光损伤大鼠模型,以滋阴明目丸进行干预,观察视网膜组织形态学的改变,检测视网膜外核层的厚度及细胞凋亡指数,探讨滋阴明目丸对视网膜光损伤大鼠的防护作用。方法:60只Sprague-Dawley(SD)大鼠采用随机数字表法分为6组:空白对照组、模型对照组、杞菊地黄丸组(阳性对照组)、滋阴明目丸低剂量组(低剂量组)、滋阴明目丸中剂量组(中剂量组)、滋阴明目丸高剂量组(高剂量组),每组10只。所有SD大鼠均在12h明(20~50Lux)和12h暗(0~12Lux)的循环光和白色荧光灯的环境下适应10天。除空白对照组外,其余5组大鼠均建立视网膜光损伤模型,光损伤处理后3天开始灌胃,连续灌胃15天后处死大鼠并摘取眼球,制备石蜡切片HE染色,显微镜下观察视网膜组织形态学变化,测量视网膜外核层厚度,光镜下观察经TUNEL法标记的凋亡视细胞切片,测量视细胞凋亡指数。结果:1、HE染色检测视网膜外核层厚度:空白对照组视网膜层次分明,结构清晰完整,染色均匀,外核层(outer nuclear layer,ONL)排列整齐,细胞形态规整,核染色深,外核层厚度为(54.59±7.42)μm;模型对照组视网膜各层结构模糊,分界不清,ONL细胞核减少,排列稀疏紊乱,厚度变薄,部分核染色变淡,外核层厚度为(16.64±5.76)μm,与空白对照组比较,P<0.01(P=0.000);低剂量组视网膜结构排列紊乱,外核层厚度薄,外核层厚度为(17.97±6.52)μm,与模型对照组比较,P>0.05(P=0.446);中剂量、高剂量组、阳性对照组视网膜结构排列基本有序,层次较分明,外核层厚度增加,与空白对照组比较,P值均>0.05,与模型对照组比较,P值均<0.01,三组组间两两比较,差异无统计学意义(中剂量组与高剂量组比较,P=0.965,中剂量组与阳性对照组比较,P=0.739,高剂量组与阳性对照组比较,P=0.758)。2、经TUNEL染色标记检测细胞凋亡指数:空白对照组外核层无细胞核被标记;模型对照组视网膜外核层中有阳性细胞核被标记,被标记的阳性细胞核呈棕黄色,核着色不均匀,细胞膜完整,染色质边聚成“新月形核”或“环形核”,核染色质浓缩在中央形成“眼球形核”;低剂量组视网膜外核层中被标记的细胞核减少;中、高剂量组及阳性对照组的外核层中被标记的细胞核明显减少。空白对照组的AI值为1.5439%±1.5154%,模型对照组AI值远高于空白对照组(P<0.01),为61.0855±4.9529%,低剂量组AI值58.7048±7.1547%,与模型对照组数值接近(P=0.527);中、高剂量组及阳性对照组AI值明显低于模型对照组(P值均<0.01),该三组间两两比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:滋阴明目丸可以增加视网膜光损伤大鼠的外核层厚度,抑制光损伤大鼠的视细胞凋亡,对视网膜光损伤大鼠具有防护作用。
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