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磁性高分子微球以其粒径小,比表面积大,分散性好,具备超顺磁性,可在外加磁场下实现快速分离等特点倍受关注,被广泛应用于细胞分离、靶向给药、固定化酶、蛋白分离等诸多领域。本文研究了聚甲基丙烯酸甲酯磁性微球(PMMA)的制备、修饰及应用,主要包括以下几个部分。(1)采用悬浮聚合法,以油酸修饰的Fe3O4为磁核,甲基丙烯酸甲酯(MMA)为单体,成功制备了粒径分布在10-25μm之间、单分散性良好的PMMA磁性微球。然后通过水解微球表面的酯基,使其表面携带丰富的羧基基团。(2)将多种间隔臂链乙二胺(EDA)、聚乙二醇400(PEG 400)、聚乙烯醇(PVA)接枝到羧基化的PMMA磁性微球表面,然后将色素配基汽巴蓝Cibacron Blue-F3GA(CB)分子修饰在微球的间隔臂链上,制得了三种汽巴蓝功能化的聚甲基丙烯酸甲酯磁性微球(CB-EDA-PMMA、CB-PVA-PMMA、CB-PEG 400-PMMA)。(3)以CB功能化磁性微球为载体,亲和吸附固定化牛血清白蛋白(BSA),考察了吸附固定化过程中各种因素对固定化率的影响,结果显示,微球表面CB修饰密度、初始BSA浓度、pH值、离子强度对微球吸附BSA有显著影响;在吸附-解吸附实验中,该CB功能化磁性微球表现出良好的重复使用性。(4)在此基础上进一步研究了CB功能化磁性微球对脂肪酶Candida rugosa lipase(CRL)的固定化效果。考查了载体表面CB修饰密度对固定化酶活性的影响,发现酶比活随着载体表面CB修饰密度的增加而逐渐降低。进而,实验优化了脂肪酶的固定化条件,即在给酶量为3 mg/g微球,pH=7.0的条件下,固定化酶的比活和活性回收率最高。最后还研究了脂肪酶的最适温度和pH稳定性,发现固定化酶的最适温度范围和pH耐受性均比游离酶显著提高。