大菱鲆与生长、耐高温性状相关的微卫星标记筛选及微卫星标记的开发研究

来源 :上海海洋大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cdronglin
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
大菱鲆(Scophthalmus maximus L.)是我国重要的海水养殖鱼类,具有较高的营养价值和经济价值。近年来,大菱鲆的种质退化现象较为严重。为保证我国大菱鲆养殖业的健康、稳定、可持续发展,目前已开始对其进行遗传改良。本文中系统阐述了国内外鲆鲽鱼类育种的研究进展。根据当前国际上鱼类遗传育种的研究趋势,认为采用选择育种与分子遗传标记技术相结合的方法对其进行遗传改良,可望提高育种成效。因此,本研究以大菱鲆为材料,筛选了与生长、耐高温性状相关的微卫星标记,并进行了大菱鲆微卫星标记的开发研究。 主要结果如下: 为了揭示出一些影响鱼类生长发育速度方面的遗传信息,本文利用分群分离分析法,以同一批受精卵孵化的同池养殖大菱鲆(Scophthalmus maximus L.)生长性状发生分离的群体为材料,进行微卫星DNA遗传分析。30个多态性微卫星位点对生长高值组(F组)和生长低值组(S组)各10个样本建立的DNA混合池进行扩增时,在两池间出现了7个差异片段。通过对两组大菱鲆个体PCR扩增出的差异条带进行统计,分析微卫星位点与大菱鲆生长性状的相关性。结果表明,有1个微卫星位点SmaC10在355bp的等位基因片段与大菱鲆生长性状存在一定的负相关性;有4个微卫星位点SmaC02、SmaC06、SmaC09、B11-I12/6/3分别在258bp、182bp、226bp、175bp的等位基因片段与大菱鲆生长性状存在正相关性,其中位点Smac09在226bp的等位基因片段与生长性状的正相关性极显著,相关系数达到0.354(P<0.01)。微卫星位点SmaC09所扩增出的等位基因片段可作为具有良好生长特性人工选育群体的分子标记指导大菱鲆的辅助育种。 采用微卫星分子标记技术分析大菱鲆耐高温相关特性,为大菱鲆的分子辅助育种提供合适的分子标记。大菱鲆经过耐高温实验处理,将其区分为耐高温组与不耐高温组,用于实验分析。采用Salah.M(1997)的方法提取大菱鲆肌肉组织的DNA,进行微卫星引物PCR(SSR-PCR)扩增,所用引物为已知的30个大菱鲆微卫星位点的侧翼保守序列。对PCR扩增出的差异条带进行个体统计,最后进行微卫星位点与耐高温性状的相关性分析。结果表明,有1个微卫星位点Sma-USC25478bp的等位基因片段与大菱鲆耐高温性状存在一定的负相关性;有3个微卫星位点Sma-USC24、Sma-USC27、Sma-USC31分别在106bp、286bp、135bp的等位基因片段与大菱鲆耐高温性状存在正相关性,其中位点Sma-USC27286bp的等位基因片段与耐高温性状的正相关性极显著,相关系数达到0.383(P<0.01),其余3个位点为一般显著性相关。微卫星位点Sma-USC27所扩增出的差异等位基因片段可作为分子标记指导耐热大菱鲆的辅助育种。 利用FIASCO的方法构建了大菱鲆以(GT)。为主的微卫星DNA富集文库,检测结果证明该微卫星DNA文库的富集效率在43%左右。测序得到88条含有微卫星DNA的序列的克隆,共得到91个微卫星DNA位点。在这些微卫星DNA位点中,除(CA/GT)n类型的微卫星DNA外,我们还观察到(AG/TC)n、(ACA)10、(ACAG)10、(GATG)8(ATGG)5等重复序列的微卫星DNA。所得到的微卫星DNA的重复次数在5-95次之间,大部分为10-20次重复,平均重复次数为18.99次。结果显示该方法可以很好的应用于鲆鲽鱼类微卫星DNA位点的分离。这些微卫星DNA标记的获得将为大菱鲆遗传多样性分析和遗传连锁图谱的构建以及分子标记辅助育种奠定基础。
其他文献
豹纹鳃棘鲈(Plectropomus Leopardus),俗名东星斑,隶属鲈形目(Perciformes)、鲈亚目(Perciformes)、鮨科(Serranidae)、石斑鱼亚科(Epinephelinae)、鳃棘鲈属,属暖水性岛礁鱼
本研究旨在开发利用一种富含油脂的金藻lsochrysis sp.CCMM5001来制备生物柴油,并从金藻Isochrysis sp.CCMM5001藻种纯化及培养条件优化、金藻油脂提取条件研究、金藻油脂制备
采用可编程序控制器(PLC)编程的逐步探索法和逻辑分析法,对三维空间牵引床控制部分进行设计。文章分析了编程原理并讨论了梯形图的设计方法。这种不用药、不用刀治疗腰椎间盘突出症
随着科学技术的发展,水泥搅拌桩技术得到了广泛的应用.水泥搅拌桩是利用水泥作为固化剂的桩体,通过配有专用钻头的深层搅拌机械在地基深部就地将软土和固化剂强制拌和,使一定
为对浸入边界-格子Boltzmann方法框架(IB-LBM)下浸入边界点数量的设置提供依据,本文采用雷诺数Re=40和100下的圆柱绕流作为理论验证模型,对不同耦合网格比CRG(Coupling Ratio
摘要:约翰凯奇独特的美学观念深深地影响了西方现代音乐的创作,并且在广泛地影响着中国的青年作曲家。他对于音乐本体论的研究体现了中国古代哲学理念,其作品《变化的声音》和《4分33秒》都成为了体现凯奇思想的代表作。  关键词:中国传统美学;禅宗;境界    在作品中使用“中国因素”的作曲家,都令笔者充满了好奇,从马勒的《大地之歌》的诗词古韵到普契尼的《图兰朵》中的民歌曲调,从斯特拉文斯基的《中国进行曲》
根据2010版《日本胃癌治疗指南》,对局部进展期胃上部癌行全胃切除加D2淋巴结清扫时,必须清扫包括脾门区淋巴结在内的第1~12组淋巴结。局部进展期胃上部癌腹腔镜脾门淋巴结清
凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)是我国重要的经济虾类。但是随着养殖强度不断增加以及养殖环境的恶化,特别是疾病的爆发,导致养殖失败。因此迫切需要针对限制凡纳滨对虾产
本文以我国重要的海水养殖鱼类大黄鱼(Pseudosciaena crocea R.)和鲈鱼(Lateolabrax japonicus)为研究对象,在海水浮式网箱(1.0×1.0×1.5m或1.5×1.5×2.0m )中进行为期56天
柔鱼是大洋性中上层渔业资源,在西北太平洋海域均有分布。我国对西北太平洋柔鱼大规模商业性开发始于上世纪90年代中期,目前柔鱼渔业已在我国远洋渔业中占有重要地位。开展柔鱼