循环肿瘤细胞（Circulating Tumor Cells，CTCs），产生于肿瘤组织的原发病灶，通过血液或淋巴液入侵循环系统。CTCs在器官或组织间的播散是造成大多数肿瘤发生转移的最主要原因，也是肿瘤的重要致死因素之一。CTCs在肿瘤的发生、发展、转移和预后方面起着决定性的作用。准确而有效的检测、富集或捕获CTCs对肿瘤的早期诊断、治疗具有重要的临床意义，有望从一定程度上改善肿瘤患者的5年生存率。　　磁性纳米粒子（Magnetic Nanoparticles，MNPs），具有优异的磁学性能和生物相容性，可经化学或物理方法，在MNPs表面进行修饰，并连接多种生物分子，如抗体、寡核苷酸、配体等，从而制备功能化探针。MNPs这种多功能纳米材料，已在生物医学领域显示出广阔的应用前景，如靶向载药、细胞和蛋白的磁分离、肿瘤磁热疗和磁共振成像等。其中在循环肿瘤细胞的检测和富集方面，MNPs具有独特的优势。　　本文以高温有机相合成的MNPs作为研究对象，用油酸钠对其进行表面修饰，连接人源化Her2单克隆抗体，制备具有Her2靶向性能的探针，评估其生物相容性，并在体内外进行了CTCs富集和捕获的实验性验证，具体如下：　　（1）采用高温分解法，在有机溶剂中制备了结构致密、粒径分布较窄的疏水性超顺磁性纳米粒子。用油酸钠对其进行表面修饰，赋予其羧基，将疏水性MNPs从有机相转移到水相。用EDC和NHS偶联Her2单克隆抗体，制备Her2-MNP探针。用紫外-可见光分光光度计、透射电镜、X射线衍射分析仪（X-Ray Diffraction， XRD）、傅里叶转化红外光谱仪（ Fourier Transform Infrared Spectroscopy，FTIR）和SDS-PAGE凝胶电泳等多种表征手段对其进行表征，以确认Her2抗体与MNPs偶联效率。结果显示，油酸钠将疏水性MNPs从有机相转移到水相，修饰后的MNPs具有良好的单分散性；Her2抗体与修饰后的MNPs正确偶联，偶联效率为71.26％；Her2-MNP探针仍然具有超顺磁性和较窄的粒径分布，为后续实验打下基础。　　（2）在体外将Her2-MNP探针与MGC-803细胞共培养，采用MTT法对上述探针的生物相容性进行体外评估。同时用Her2-MNP探针分别对Her2抗原表位阳性的MGC-803细胞，及Her2抗原表位阴性的GES-1细胞进行标记，对标记后的细胞进行普鲁士蓝染色，用光学显微镜、透射电镜和扫描电镜进行形态学分析，检测Her2-MNP探针能否对Her2抗原表位阳性细胞进行特异性标记。在体外采用模拟血流系统，在外加磁场的作用下检测该探针对 Her2相关的CTCs的富集和捕获效果，并精确计算其捕获效率。结果显示，Her2-MNP探针具有良好的体外生物相容性，在0~100μg/ml浓度范围内与MGC-803细胞培养24 h，细胞活性仍超过89%；Her2-MNP探针可以在体外对Her2抗原表位阳性的CTCs进行选择性标记，并可以在外加磁场下捕获标记的CTCs，捕获效率达3242±929个/min。　　（3）本部分实验采用磁共振成像（Magnetic Resonance Imaging，MRI）、近红外（Near Infrared Region，NIR）成像和组织学分析等手段，在体内验证Her2-MNP探针对CTCs的捕获性能。首先计算不同浓度上述制备的Her2-MNP探针，及不同数量Her2-MNP探针标记的MGC-803细胞磁共振成像的T2加权弛豫率1/T2（r2）。经裸鼠尾静脉注射上述探针和MGC-803细胞，在股静脉处设置外加磁场，MRI和NIR动态监测上述探针在体内的分布。评估上述制备的Her2-MNP探针在体内对CTCs的标记和捕获效果。分离试验小鼠的主要器官和股静脉进行普鲁士蓝染色和HE染色，从组织学水平评估上述探针在体内的生物相容性和磁捕获效率。结果显示，上述探针可以作为磁共振T2加权成像对比剂；在外加磁场作用下，捕获后24 h，股静脉处磁共振成像T2弛豫显著增强；注射后20 min，近红外信号开始在股静脉处聚集；股静脉切片HE染色显示血管壁有CTCs聚集，其他主要脏器HE染色显示没有明显的炎症浸润和淋巴细胞聚集。本部分实验结果证实Her2-MNP探针可以在体内标记并在外加磁场下捕获CTCs。另外，上述探针具有良好的体内生物相容性。