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目的观察ARGl基因对293T细胞的增殖、凋亡以及p-JNK、p-ERK表达量的影响,并探讨ARG1的抗砷作用。方法(1)重组质粒pcDNA-ARG1及空质粒抽提后采用PCR、EcoR1(?)(?)BamH1双酶切的方法进行质粒鉴定,最后进行质粒DNA测序；(2)将ARG1表达质粒pcDNA3.1-IE-ARG1及空载体对照质粒pcDNA3.1-IE分别经阳离子脂质体(Lipofectamine2000)介导转染入293T细胞后,采用荧光共聚焦显微镜观察细胞转染效果；(3)提取细胞总RNA后进行逆转录,然后使用Real-Time PCR的方法检测转染后293T细胞的ARG1表达量；(4)将实验组pcDNA3.1-IE-ARG1-293T细胞、空白对照组pcDNA3.1-IE-293T细胞及阴性对照组293T细胞分别与0、1、2、4、8、16、32μmo1/L浓度的NaAsO2孵育48 h后,使用MTT法检测ARG1基因对砷染毒后293T细胞增殖的影响；(5)根据MTT结果将实验组、空白对照组及阴性对照组细胞分别与0、1、4、8μmo1/L浓度NaAs02孵育48 h后,加入Annexin V FITC/PI凋亡试剂,采用流式细胞仪检测细胞的凋亡情况；同时提取细胞的蛋白后,采用WesternBlot法检测p-JNK、p-ERK蛋白的表达情况。结果(1)PCR及酶切结果显示我们所克隆的的基因长度止确,测序结果得出基因的序列也完全正确；(2)荧光共聚焦显微镜观察转染有目的基因的239T细胞膜表达强绿色荧光,转染空载体细胞细胞内表达绿色荧光呈弥散状态,细胞计数显示转染率可达75-85%；(3) Real Time PCR结果表明293T细胞ARG1表达量很低,转染后细胞ARG1的表达量是空白对照组及阴性对照组的10倍左右(p<0.05)(4) NaAsO2在1-8μmol/L时,ARG1基因过表达的239T细胞增殖抑制率明显低于对照组(p<0.05)而在浓度>8 pmol/L时则没有明显差异(p>0.05)；(5)NaAs02浓度≤8μmol/L时,ARG1基因过表达的239T细胞凋亡率明显低于对照组(p<0.05)；(6)p-JNK表达量在转染前后均随着NaAsO2浓度的增加而增加,但是ARG1基因过表达的239T细胞的p-JNK的表达量在各浓度均明显低于空白对照组及阴性对照组(p<0.05)；当NaAsO2的浓度在0-4μmol/L时,ARG1基因过表达的239T细胞p-ERK的相对表达量随着砷浓度的增加而增加,在8μmol/L时表达量有所下降,但是仍然高于对照组,且差异具有统计学意义(p<0.05)结论ARGl对≤8μmol/L的NaAsO2中毒具有抗砷作用,其抗砷作用与MAPK的两个信号通路密切相关。