【摘 要】
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文冠果颈腐病是危害文冠果产量的一种病害,它们侵染植物的根部,使植株的根颈部腐烂发褐,茎部和叶片干枯枯黄,最终导致整株植株死亡。文冠果颈腐病属于土传病害,土传病害在作物上是一类较难治理的病害,该类病害感染途径很多,最终将在土壤中发现致病菌。经过分离病株,形态鉴定(培养形态、产孢形态)及分子鉴定(ITS鉴定、TEF鉴定)得到主要病原菌为尖孢镰刀菌、腐皮镰刀菌和层生镰刀菌,主要结果如下:1.分离所得到的
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文冠果颈腐病是危害文冠果产量的一种病害,它们侵染植物的根部,使植株的根颈部腐烂发褐,茎部和叶片干枯枯黄,最终导致整株植株死亡。文冠果颈腐病属于土传病害,土传病害在作物上是一类较难治理的病害,该类病害感染途径很多,最终将在土壤中发现致病菌。经过分离病株,形态鉴定(培养形态、产孢形态)及分子鉴定(ITS鉴定、TEF鉴定)得到主要病原菌为尖孢镰刀菌、腐皮镰刀菌和层生镰刀菌,主要结果如下:1.分离所得到的菌株:从山东省潍坊市安丘市沃奇农业有限公司基地的组织样本中分离到菌株12份,从山东省青岛市胶州洋河镇文冠果基地的组织样本中分离到菌株4份,从山东农业大学岱岳区马庄基地的组织样本中分离到菌株5份。经病原培养学观察和形态特征,加以ITS和TEF辅助可得,腐皮镰刀菌(Fusarium solani)占47.62%,尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)占33.33%,层生镰刀菌(Fusarium proliferatum)占19.05%。2.形态鉴别:选用了马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)来培养菌株,从培养形态上大致得到几类菌株,从孢子形态上能够得到3种镰刀菌,分别是尖孢镰刀菌、腐皮镰刀菌、层生镰刀菌。菌株在PDA培养基上的长势较快,在培养过程中颜色会发生变化。尖孢镰刀菌在PDA培养基上呈白色、粉红色,大分生孢子细长、弯刀型、多隔,小分生孢子假头状着生,顶细胞似喙状,简单瓶梗、瓶梗较短,有厚垣孢子。腐皮镰刀菌在PDA培养基上呈白色、淡黄色、浅紫色,大分生孢子较多、粗壮,小分生孢子假头状着生,简单瓶梗、瓶梗较长,有厚垣孢子。层生镰刀菌,在PDA培养基上呈白色、淡紫色,大型分生孢子镰刀型直而细长,顶细胞尖而弯曲,小型分生孢子链状、假头状或聚生,产孢细胞复瓶梗,无厚垣孢子。3.ITS和TEF鉴定:采用了两种分子生物学方法进行鉴定,先进行ITS序列测定,然后再进行TEF序列测定,结果鉴定到镰刀菌。4.接种(柯赫氏法则,Koch’s postulate)经形态和分子鉴定大致得到了病原菌,用这些病原菌去侵染健康的植株。选用两个月的健康植株,作根部刺伤处理,观察病害情况。经接种发现,文冠果受侵染的植株与田间发病植株表现相同,也是根部褐色腐烂,叶片呈现干枯发黄。再将菌株进行分离鉴定,得到的菌株同之前分离鉴定的结果相同,即尖孢镰刀菌、腐皮镰刀菌、层生镰刀菌,符合柯赫氏法则。
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