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本文对曼地亚红豆杉枝叶中紫杉醇的提取和分离进行了系统的研究。从曼地亚红豆杉枝叶提取紫杉醇有其特殊的困难,即枝叶中含有大量的蜡质、色素等,这些物质在进行提取时也会被提取出来从而使得分离过程更加困难。针对这一特点,本文设计了正己烷萃取和碱洗相结合的方法,先以正己烷萃取除去蜡质等低极性物质,再进行碱洗除去高极性杂质,这种方法可以除掉86%以上的杂质,极大提高了色谱柱的处理效率。经过考察乙醇、甲醇、氯仿、丙酮、乙酸乙酯及丙酮和乙酸乙酯混合液等提取溶剂,从提取率、紫杉醇纯度,提取液处理的难易,及经济因素等方面综合考虑,选定无水乙醇作为提取溶剂,其提取条件经单因素实验和正交实验后得到优化:浸提温度为50℃,恒温浸提2h,料液比1:20。紫杉醇的首次提取率为74.80%,经三次提取提取率达99.21%。同时比较了超声提取和索氏提取两种提取方法。超声提取以无水乙醇为提取溶剂,料液比1:20,经两次40min的提取,其提取率既达98.44%。与常规溶剂浸提相比,在较低浸提温度下大大缩短了提取时间,同时保证了提取率。采用索氏提取一小时回流三次,提取6小时,提取得率。索氏提取提取温度高,导致紫杉醇异构化,且提取时间长,提取率反而低下。提取粗产物经层析柱的提纯分离,本文中比较了硅胶,大孔树脂AB-8两种吸附层析用于从粗产物中分离紫杉醇。在硅胶柱层析中,通过考察层析洗脱速度、进料量、层析柱高等因素,优化操作条件,确定了层析工艺:氯仿湿法装柱,装柱规格为φ25×400mm,上样量以0.5-0.75g为宜,洗脱流速控制为1-1.5mL/min之间,先以氯仿进行充分淋洗,后换以3%的甲醇氯仿溶液洗脱。经一次层析,紫杉醇纯度达5.82%,回收率为98.78%。在AB-8层析中,其层析工艺为:湿法装柱,装柱规格为φ25×400mm,洗脱流速控制为1.5mL/min,先以3BV30%乙醇溶液进行洗脱,后续以3BV50%乙醇溶液,再以3BV70%乙醇溶液进行洗脱,收集70%乙醇的洗脱液。经一次层析,紫杉醇纯度达3.25%,回收率为99.36%。二次层析工艺为:先以3BV60%乙醇溶液进行洗脱,再以3BV70%乙醇溶液洗脱,洗脱速度控制为1.5mL/min。经二次层析,此时紫杉醇纯度达到18.43%,回收率为96.46%。实验过程中采用反相HPLC法进行检测分析,通过实验确定其色谱条件为:以C18为固定相,甲醇.水(65:35)为流动相,检测波长为227nm,柱温(25±1)℃,流速为0.7mL/min。采用外标峰面积法进行定量分析。经分析该曼地亚红豆干杉枝叶中紫杉醇含量为0.0126%,RSD为1.46%。