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目的:泌乳素瘤危害人体健康,其发病机制尚不清楚,目前国内上市药物仅溴隐亭一种,且易发生耐药现象。此外,女性发病率远高于男性,尤其是在年轻时更为明显,这可能与雌激素水平有关。因此,揭示泌乳素瘤的发病机制和开发新的治疗方法具有重要意义。本研究在前期基础上探索TLR4在雌二醇诱导泌乳素瘤进程中发挥的作用,并针对TLR4/p38MAPK通路寻找抑制泌乳素瘤的靶点。方法:对C57BL/6小鼠和人泌乳素瘤垂体标本ERβ、TLR4和PRL的表达进行免疫荧光或免疫组化检测。本研究采用雌二醇诱导的C57BL/6野生型（WT）小鼠模型和TLR4-/-小鼠模型,研究TLR4在泌乳素瘤中的作用。用雌二醇、氟维司群、脂多糖或si TLR4转染MMQ细胞,研究ERβ、TLR4和PRL在MMQ细胞中的表达。TLR4抑制剂TAK242用于研究雌二醇诱导泌乳素瘤小鼠模型的药效作用。TAK242的脂质体的制备。（一）收集泌乳素瘤患者和其他垂体疾病患者的垂体标本,制备石蜡标本,用免疫组织化学法检测样本中ERβ、TLR4和PRL的表达,对ERβ、TLR4进行全扫描组织化学评分并检测其相关性。用免疫荧光法检测PRL（+）和PRL（-）组织中TLR4和PRL的表达与共定位。（二）用不同浓度的雌二醇和氟维司群诱导泌乳素瘤细胞MMQ,筛选合适的雌二醇和氟维司群干预浓度。用筛选出的雌二醇和氟维司群浓度干预不同时间MMQ确定合适的干预时间。预先使用氟维司群阻断雌激素受体后再使用雌二醇干预MMQ检测PRL及ER/TLR4/p38MAPK通路指标的表达。使用si TLR4干预MMQ检测检测PRL及ER/TLR4/p38MAPK通路指标的表达,同时用雌二醇和脂多糖干预MMQ检测检测PRL及ER/TLR4/p38MAPK通路指标的表达。（三）制备雌激素诱导的泌乳素瘤TLR4-/-小鼠模型,研究TLR4敲除对泌乳素瘤的影响。将小鼠分为4组:WT组;ES组;TLR4-/-组;TLR4-/-ES组。造模方法:模型组腹腔注射苯甲酸雌二醇,4天一次,共注射10次,单次剂量为20mg/kg。造模完成后,采集各组小鼠血清用于ELISA测定血清PRL水平,取小鼠垂体组织称重后,每组选取3个样本提取总蛋白,Western blot法测定ER/TLR4/p38MAPK通路指标和PRL的表达。每组选取3个样本石蜡包埋,免疫组化和免疫荧光法测定ERβ、TLR4和PRL的表达与定位。（四）制备雌激素诱导的泌乳素瘤小鼠模型,研究TLR4抑制剂TAK242对泌乳素瘤的药效作用。将小鼠分为5组:对照组;模型组;溴隐亭组;TAK242组（0.15mg/kg）;TAK242组（0.3mg/kg）。造模方法:模型组腹腔注射苯甲酸雌二醇,4天一次,共注射10次,单次剂量为20mg/kg。造模完成后,溴隐亭组灌胃溴隐亭1.6mg/kg,每日一次,共一个月;TAK242组分别腹腔注射TAK242组（0.15mg/kg或0.3mg/kg）,一周两次,共四周。给药结束后,采集各组小鼠血清用于ELISA测定血清PRL水平,取小鼠垂体组织称重后,每组选取3个样本提取总蛋白,Western blot法测定ER/TLR4/p38 MAPK通路指标和PRL的表达。每组选取3个样本石蜡包埋,免疫组化和免疫荧光法测定TLR4和PRL的表达与定位。（五）薄膜分散法制备TAK242脂质体。以包封率为衡量指标,通过单因素分析筛选药脂比、磷胆比、超声功率。筛选出最佳的TAK242脂质体的处方条件。结果:（一）人垂体组织切片免疫组化结果显示,ERβ和TLR4在垂体瘤组织中表达显著高于阴性对照组,并且ERβ和TLR4的表达具有很强的正相关性,同时,免疫荧光结果发现TLR4和垂体瘤标志指标PRL具有很强的共定位和共表达。（二）不同浓度的E2和Ful干预MMQ细胞48h,最终100n M的E2能上调MMQ细胞PRL及ER/TLR4/p38MAPK通路蛋白的表达,而100n M的Ful能下调MMQ细胞PRL及ERβ/TLR4/p38MAPK通路蛋白的表达;预先用Ful阻断ER受体后,再给与E2后PRL及ERβ/TLR4/p38MAPK通路蛋白表达未上调;转染敲低TLR4的表达后,ERβ/TLR4/p38 MAPK通路和PRL蛋白的表达下调;在同时激活ERβ和TLR4（E2+LPS组）比单独激活ERβ或TLR4时,ERβ/TLR4/p38 MAPK通路和PRL蛋白的上调作用更加明显。（三）雌激素诱导的泌乳素瘤小鼠模型成功建立。称重结果显示,与WT小鼠比较,注射ES小鼠垂体重量/体重显著增加,而相对于注射ES小鼠,注射ES的TLR4-/-小鼠垂体重量/体重显著降低;ELISA结果显示,与WT小鼠比较,注射ES小鼠血清PRL含量显著增加,而相对于注射ES小鼠,注射ES的TLR4-/-小鼠血清PRL含量显著降低;Western blot检测结果显示,与WT小鼠比较,注射ES小鼠垂体PRL及ERβ/TLR4/p38MAPK通路蛋白显著升高,而相对于注射ES小鼠,注射ES的TLR4-/-小鼠垂体PRL及ERβ/TLR4/p38MAPK通路蛋白显著降低。（四）TLR4抑制剂TAK242对泌乳素瘤小鼠的药效学研究。称重结果显示,相对于Con组小鼠,ES组小鼠垂体重量/体重显著增加,而相对于ES组小鼠,ES+Bro组小鼠垂体重量/体重显著降低,ES+TAK242（0.15mg/kg）组小鼠垂体重量/体重显著降低,ES+TAK242（0.3mg/kg）组小鼠垂体重量/体重显著降低;ELISA结果显示,相对于Con组小鼠,ES组小鼠血清PRL含量显著增加,而相对于ES组小鼠,ES+Bro组小鼠血清PRL含量显著降低,ES+TAK242（0.15mg/kg）组小鼠血清PRL含量显著降低,ES+TAK242（0.3mg/kg）组小鼠血清PRL含量显著降低;Western blot检测结果显示,相对于Con组小鼠,ES组小鼠垂体PRL及TLR4/p38MAPK通路蛋白显著增加,而相对于ES组小鼠,ES+Bro组小鼠垂体PRL及TLR4/p38MAPK通路蛋白显著降低,ES+TAK242（0.15mg/kg）组小鼠垂体PRL及TLR4/p38MAPK通路蛋白显著降低,ES+TAK242（0.3mg/kg）组小鼠垂体PRL及TLR4/p38MAPK通路蛋白显著降低。（五）薄膜分散法制备TAK242脂质体,以包封率为衡量指标,筛选出最优处方工艺为:TAK242:卵磷脂:胆固醇=1:10:1,超声功率为150W,所制备的脂质体粒径合适,电镜下形态圆整,包封率高。结论:雌二醇通过ERβ激活TLR4/p38 MAPK通路促进泌乳素瘤的发生,而抑制TLR4会抑制垂体泌乳素的分泌与合成,提示TLR4可能作为治疗泌乳素瘤的靶点。结论:TLR4/p38MAPK通路参与了雌激素诱导的泌乳素瘤的发病。抑制TLR4能够抑制雌激素引起的垂体的过度增殖和血清PRL的分泌,揭示了TLR4可作为泌乳素瘤的治疗靶点,其抑制剂TAK242脂质体或可开发为治疗泌乳素瘤的药物。