【摘 要】
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为了有效地利用RNA的干涉进行植物基因的功能研究,该研究中构建了两个用于RNAi通用载体pRNAi.载体分别以Ubi和CAMV35S为启动子,都包含两个多克隆位点(MCS),方便基因的正向和
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为了有效地利用RNA的干涉进行植物基因的功能研究,该研究中构建了两个用于RNAi通用载体pRNAi.载体分别以Ubi和CAMV35S为启动子,都包含两个多克隆位点(MCS),方便基因的正向和反向克隆.用pRNAi载体可以迅速有效获得目的基因的dsRNA结构,所需的步骤包括目的基因的PCR扩增,PCR产物和载体的酶切、连接到第一个MCS、筛选重组子,将重组载体中装载的片段用通用引物扩增,酶切后反向克隆到pRNAi载体的第二个NCS.然后可以用于转化水稻愈伤组织,再生得到转化苗.该研究中所构建的用于基因沉默的通用载体pRNAi,结合成熟的农杆菌转化水稻的技术,为水稻基因功能的鉴定提供了良好的工具.
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