前言　　阿尔茨海默病(Alzheimersdisease，AD)是老年痴呆的主要类型，发生于老年前期及老年期，表现为一种持续性高级神经功能活动障碍，定向力改变、记忆力减退、智力下降等，最终导致生活自理能力完全丧失。随着全球人口老龄化进程加快，AD等神经退行性疾病在老年人中的发病率居高不下，给社会和家庭带来沉重的负担。　　AD的发病与机体衰老、遗传因素及某些环境危险因素等有关，其大体病理改变以脑萎缩为主，表现为脑回变窄、脑沟增宽、脑室变大，镜下病理改变多见于老年斑(Senileplaques，SP)、神经原纤维缠结(Neurofibrillarytangles，NFT)、神经元减少等。目前关于AD的发病机制存在多种假说，其中β-淀粉样蛋白(Betaamyloidprotein，Aβ)级联假说在AD形成的各种机制中占主导地位，该假说认为，Aβ沉积是AD发生、发展的中心环节，也可能是各种因素导致AD的共同途径。Aβ产生和清除平衡的破坏是其在脑内沉积的主要原因，因此，减少Aβ生成及增加Aβ从脑内的清除可有效延缓AD的发生发展。淀粉样前体蛋白β位分解酶1（Beta-siteAPP-cleavingenzyme-1，BACE1）是脑内最主要的β-分泌酶，其裂解β-淀粉样前体蛋白（Beta-amyloidprecursorprotein，APP）最终生成Aβ;而胰岛素降解酶(Insulin-degradingenzyme，IDE)主要在脑部神经元表达，参与降解可溶性的Aβ，其降解产物不再聚集和沉积，也不具有神经毒性。可见，BACE1和IDE是参与脑内Aβ的生成和清除的关键酶。　　目前尚无针对AD的特效药物，故AD的早期预防至关重要。植物化学物在防治AD的研究中日益受到关注，莱菔硫烷(Sulforaphane，SFN)是一种异硫氰酸盐，广泛存在于西兰花、卷心菜等十字花科蔬菜中。在中枢神经系统缺血性损伤模型的研究中发现，SFN具有较好的神经保护作用。最新研究报道，SFN可明显改善经脑内单次注射Aβ的AD模型小鼠的学习记忆能力和认知功能，然而其体外实验结果并未发现SFN对Aβ聚集有抑制作用。因此，关于SFN对AD的干预作用及其机制尚有待证实和探讨。　　本研究采用铝和D-半乳糖(D-galactose，D-gal)联合染毒制备AD模型小鼠，通过检测血铝水平确定受试小鼠铝的内暴露量，采用跳台试验分析SFN对AD模型小鼠学习记忆能力的影响，并从脑组织Aβ沉积情况及Aβ代谢相关酶BACE1、IDEmRNA表达水平角度初步探讨其可能的作用机制，为寻找防治AD的有效措施提供理论依据。　　材料与方法　　一、动物分组、处理及样品采集　　健康成年C57BL/6J小鼠30只，雌雄各半，体重范围:18-22g，适应性喂养一周后按体重随机分为对照组、模型组及干预组，每组10只。给药途径及剂量如下:模型组和干预组小鼠饮用含铝水(0.4g/100ml)并隔日皮下注射200mg/kgD-gal，此外，干预组小鼠每日一次灌胃给予25mg/kgSFN，模型组小鼠每日一次灌胃等量蒸馏水，同时设立溶媒对照组，实验期间小鼠自由摄食及饮水。于处理第80d开始进行为期2d的神经行为学测试，并于处理后第90d，乙醚麻醉小鼠，摘眼球取血，离心，取上清供血铝水平测定;剥离右侧大脑皮质用于测定BACE1和IDEmRNA表达水平;将左侧半脑放入多聚甲醛固定液中固定，石蜡包埋后行冠状位连续切片，用于分析脑组织Aβ沉积情况。　　二、检测指标及方法　　（一）、一般状况观察、体重、脑重及脑系数　　每日一次观察各组小鼠一般状况，并每周称重一次观察体重变化。小鼠处死后取脑并称重，按下列公式计算脑系数:脑系数(mg/g)=脑重(mg)/体重(g)。　　（二）、血铝水平　　利用石墨炉原子吸收分光光度法检测各组小鼠血铝水平。　　（三）、学习记忆能力　　采用跳台试验分析各组小鼠的学习记忆能力。　　（四）、脑组织Aβ沉积　　应用免疫组化法检测各组小鼠大脑皮质及海马Aβ沉积情况。　　（五）、大脑皮质BACE1、IDEmRNA表达水平　　用RNeasy离心柱试剂盒提取总RNA，逆转录为cDNA，再采用SYBRGreenⅠ嵌合染料法对目的基因进行Real-timePCR扩增反应，以β-actin作为内参，分析BACE1、IDEmRNA的相对表达水平。　　三、统计分析　　实验数据均采用SPSS13.0统计软件进行分析，符合正态分布的数据，实验结果用(x)±s表示，进行单因素方差分析(ANOVA)。满足方差齐性时，两两比较采用LSD;不满足方差齐性时，两两比较采用DunnettsT3法;不符合正态分布的数据，实验结果用中位数(M)和四分位间距(Q)表示，进行多个独立样本的非参数秩和检验。检验水准:α=0.05。　　结果　　一、一般状况观察、体重、脑重及脑系数　　整个受试期间各组小鼠活动自如，状态良好，未见异常表现及死亡。各组小鼠的体重、脑重及脑系数，差异均无统计学意义(P＞0.05)。　　二、血铝水平　　模型组和干预组小鼠血铝水平高于对照组，差异均有统计学意义（分别为P＜0.01和P＜0.05）。干预组小鼠血铝水平低于模型组，差异有统计学意义（P＜0.05）。　　三、学习记忆能力　　跳台试验结果显示，与对照组相比，模型组小鼠反应期延长，潜伏期缩短，学习和记忆成绩的错误次数增多，差异均有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05);与模型组相比，干预组小鼠反应期期缩短，潜伏期延长，学习和记忆成绩的错误次数减少，差异均有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05)。干预组小鼠反应期、潜伏期、学习和记忆的错误次数与对照组相比，差异均无统计学意义（P＞0.05）。　　四、脑组织Aβ沉积　　与对照组相比，模型组小鼠大脑皮质和海马Aβ斑块数量增多，而干预组小鼠大脑皮质和海马Aβ斑块少于模型组，差异均有统计学意义(P＜0.01)。干预组小鼠大脑皮质和海马Aβ斑块数量与对照组相比，差异无统计学意义(P＞0.05)。　　五、大脑皮质BACE1、IDEmRNA表达水平　　各组小鼠大脑皮质BACE1、IDEmRNA表达水平，差异均无统计学意义(P＞0.05)。　　结论　　SFN可能通过降低AD模型小鼠铝的内暴露量，减少脑组织Aβ斑块沉积，进而改善AD模型小鼠的学习记忆能力，但模型组及干预组小鼠大脑皮质Aβ代谢相关酶BACE1、IDEmRNA表达水平均未见明显改变。