绿色巴夫藻(Pavlova viridis)属于真核微藻,多不饱和脂肪酸如DHA和EPA含量较高,是克隆脂肪酸去饱和酶的很好实验材料.该论文通过对绿色巴夫藻的藻种纯化,得到微藻的纯培养,进行培养条件的优化,获得大量藻体.提取绿色巴夫藻总RNA,建立其cDNA文库,为筛选脂肪酸去饱和酶基因打下基础.微藻的保存方式多以传代接种,在操作过程中极易被杂菌污染,由此为微藻的生理生化和遗传学研究带来困难.为了获得纯藻种,分别使用不同抗生素的混合加入法、逐步加入法及过滤除菌等技术对绿色巴夫藻进行了纯化研究.实验结果表明,以逐步加入氨苄青霉素钠,硫酸庆大霉素,硫酸阿米卡星以抑制细菌生长为最佳,并通过此方法得到了绿色巴夫藻的纯培养.微藻为自养生活,生长缓慢,细胞得率低,为提高其生物量,得到大量藻体,对影响绿色巴夫藻生长的主要培养条件如微量盐离子(stock solution Ⅱ)、微量营养元素(stock solution Ⅲ)及光照时间等因素进行了优化.实验结果表明,以海水F/2培养基为基础,加入5‰溶液Ⅲ,全天光照条件下培养,该藻的生长状况最好.