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目的：研究miR-21对大肠癌HT-29细胞生物学行为的影响，观察细胞对5-Fu及放射线敏感性的变化。方法：转染pre-miR-21慢病毒组为实验组，HT-29细胞组为空白对照组，转染无义序列NC慢病毒和U6慢病毒为阴性对照组。构建pre-miR-21慢病毒载体，荧光显微镜下评估转染情况，Taqman Real-time PCR检测转染前后miR-21表达变化，采用CCK-8法检测miR-21对细胞增殖能力影响，流式细胞仪检测细胞转染前后细胞周期分布情况及凋亡能力，细胞克隆形成实验检测细胞克隆形成能力，Transwell小室法观察细胞体外侵袭力。CCK-8法检测细胞对5-FU化疗敏感性变化，并计算各组半数抑制率（IC50），MMT法检测细胞对放疗敏感性。每项实验至少重复3次。结果：实时荧光定量PCR结果显示pre-miR-21慢病毒组miR-21表达升高4.228倍(p＜0.01)。与空白对照组和两组阴性对照组相比，上调miR-21表达明显促进HT-29细胞增殖（p＜0.01）；克隆形成能力显著增强（559±19vs375.67±21.01p＜0.01）；细胞凋亡减少（p＜0.05），早期凋亡（1.1±0.26vs6.67±0.81）%，晚期凋亡和死亡细胞（1.33±0.85vs5.53±1.1）%；细胞周期重新分布，G0/G1期向S期转换，G0/G1期细胞比例明显降低（36.53±0.92vs60.18±0.93）%（p＜0.01），S期细胞比例升高（56.8±1.02vs33.0±1.01）%（p＜0.01），G2/M期细胞比例无差异；细胞体外侵袭能力增强（穿膜细胞数104.8±6.72vs34.2±2.59，p＜0.01）；miR-21抵消部分5-FU化疗作用使化疗敏感性降低,上调组IC50（232.73±21.69μg/ml）是空白对照组（112.46±15.26μg/ml）的2.07倍(p＜0.01），细胞对X线放疗抑制率降低（16.76±1.87vs36.14±1.54）%（p＜0.05）。结论：慢病毒载体对HT-29细胞转染效率高。上调HT-29细胞miR-21表达能够抑制肿瘤细胞凋亡，促进细胞增殖能力、克隆形成能力及体外侵袭性，增加肿瘤细胞对5-FU及放射线的抵抗力。