当归贝母苦参丸含药血清对胃癌细胞增殖及侵袭转移的影响

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目的:通过研究当归贝母苦参丸含药血清对胃癌SGC-7901、MKN-45增殖及侵袭转移能力的影响,探讨当归贝母苦参丸含药血清抑制胃癌SGC-7901、MKN-45细胞增殖的作用及其相关机制;方法:不同浓度含药血清处理SGC-7901、MKN-45细胞后,(1)MTT法测定细胞活力;(2)流式细胞术检测细胞周期;(3)Trans-well侵袭转移实验及划痕实验观察侵袭能力转移能力;(4)qRT-PCR技术检测COX-2、BCL-2、BAX、PTEN基因表达;(5)免疫细胞化学技术检测COX-2、BAX、PTEN蛋白表达情况。结果:(1)不用浓度的当归贝母苦参丸含药血清均能抑制细胞增殖,在10%浓度时抑制作用达最大值,作用于SGC-7901细胞72h的抑制率分别为:高剂量组达到34.51%,中剂量组为31.69%,低剂量组为19.78%;作用于MKN-45细胞组72h的抑制率分别为:高剂量组35.66%,中剂量组34.27%,低剂量组22.38%,差异异有统计学意义(P<0.05);(2)流式细胞术检测显示:高剂量组作用SGC-7901细胞S期比例由46.5%下降到13.7%,G1/G2期比例由53.5%上升到74.1%;高剂量组作用MKN-45细胞S期比例由44.9%下降到9.94%,G1/G2期比例由55.1上升到72.1%;(3)侵袭转移实验结果示:高剂量组作用SGC-7901细胞侵袭能力下降40.48%、转移能力下降46.88%、迁移能力下降41.30%;高剂量组作用MKN-45细胞侵袭能力下降移37.23%、转移能力下降50%,迁移能力下降36.46%,差异有统计学意义(P<0.05);(4)qRT-PCR结果示:SGC-7901细胞中高剂量组COX-2和BCL-2mRNA的表达量分别下降68%、77%;BAX和PTEN mRNA的表达量分别升高99.7%和85.6%;MKN-45细胞中高剂量组COX-2和BCL-2mRNA的表达量分别下降90%和91%,BAX和PTEN mRNA的表达量分别升高98.65%和89.72%,差异有统计学意义(P<0.05);(5)免疫细胞化学染色显示:含药血清可以降低SGC-7901细胞COX-2的蛋白平均灰度值升高,阳性表达率下降;BAX和PTEN的蛋白平均灰度值下降,其阳性表达率表达率升高;含药血清可以降低MKN-45细胞细胞COX-2的蛋白平均灰度值升高,阳性表达率下降,BAX和PTEN的蛋白平均灰度值下降,其阳性表达率表达率升高,差异具有特举行意义(P <0.05,空白血清组除外)。结论:当归贝母苦参丸含药血清可以抑制SGC-7901、MKN-45细胞增殖,减弱其侵袭转移能力,其机制可能与其干预细胞周期、影响COX-2、BCL-2、BAX、PTEN mRNA及蛋白有关。
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