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研究背景：高脂血症是体内脂类代谢紊乱导致血脂水平增高的一种病理生理状态，可导致动脉粥样硬化的形成，从而引起多种心脑血管疾病。高脂血症特别是高胆固醇血症引起的血管内皮功能障碍，是动脉粥样硬化导致各种心脑血管并发症发生发展的始动环节，而血管内皮功能障碍的重要机制之一为氧化应激，过多的一氧化氮（NO）可与超氧化物结合形成过氧亚硝基阴离子（ONOO~-），ONOO~-具有极强的细胞毒性，其化学性质不稳定且氧化力强，通过对蛋白的氧化/硝基化作用，引起血管内皮的氧化应激和组织损伤，从而加重内皮损伤。脂联素（APN）是近年发现的一种由脂肪细胞特异分泌的细胞因子，是一种内源性的血管保护因子。血循环中的脂联素主要以三聚体（即低分子量，LMW），六聚体（即中分子量，MMW）及高聚体（即高分子量，HMW）的形式存在，其血浆含量还可因机体代谢情况和疾病状态而改变，具有改善胰岛素敏感性、抗炎、抗动脉粥样硬化等多种生理功能。肿瘤坏死因子α（TNF-α）是脂肪细胞分泌的另一种细胞因子，可通过促进粘附分子的表达，炎症细胞的募集和激活，并可通过影响脂质代谢而促进动脉斑块形成的作用。前期动物研究发现，高胆固醇血症大鼠血浆中炎症因子TNF-α水平、内皮损伤相关因子ONOO~-以及内源性脂联素水平均显著升高，而给予外源性脂联素进一步增加其水平可有效减少TNF-α和ONOO~-的生成。研究证明，在脂联素多聚体的三种形式中，HMW具有较为明确的保护内皮细胞的作用。那么，在人类情况如何呢？是否在人类动脉粥样硬化性疾病中也发挥作用呢？特别是在单纯高胆固醇血症患者与合并冠心病的患者中，ONOO~-、脂联素及其多聚体与TNF-α的水平如何变化，其相互关系如何，目前仍缺乏相关的研究报道。为此，本研究拟通过观察不同程度、及是否合并冠心病的高胆固醇血症患者进行血浆中ONOO~-、APN与TNF-α水平检测，以其探讨高胆固醇对血管内皮的损伤及脂联素对其调节作用，为进一步明确高胆固醇血症对动脉粥样硬化性心血管疾病的防治提供新的依据。研究目的：观察健康人、单纯高胆固醇血症患者和合并冠心病患者不同组中血浆ONOO~-、APN与TNF-α的水平；探讨不同组别中ONOO~-、APN和TNF-α的变化、其与冠心病发生的相关性及可能的机制。实验方法：收集2010年1月至2010年12月期间于第四军医大学第一附属医院老年病科就诊，年龄在40到60岁之间的男性患者。实验分为3组，分别为：单纯低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）边缘升高组（50例），高胆固醇血症合并冠心病组（50例），和健康对照组（40例）。以上各组之间年龄、体重指数均进行均衡性检验，无统计学差异（P>0.05）。取清晨空腹静脉血，分离血清，用ELISA试剂盒行脂联素、TNF-α、过氧亚硝酸根阴离子（ONOO~-）的标记物硝基酪氨酸（NT）的平行测定。实验结果：1. LDL-C边缘升高组（HL）、高胆固醇血症合并冠心病组（HCHD）与正常对照组（CON）的年龄、体重指数、血压、血糖、甘油三酯、高密度脂蛋白及糖化血红蛋白等代谢性指标均无显著性差异（P>0.05）。LDL-C水平在HL组和HCHD组显著高于CON组（P<0.05），血浆总胆固醇的水平在HL组较CON组无显著差异（P>0.05），HCHD组则显著高于CON组（P<0.01）。2.血浆NT水平在HL组显著高于CON组（24.78±2.21vs12.51±3.58,P<0.05)，在HCHD组则显著高于HL组（50.63±5.62vs24.78±2.21,P<0.01）；TNF-α水平在HL组明显低于对照组（50.37±16.31vs101.8±15.66,P<0.05），在HCHD组则明显高于对照组（185.42±16.73vs101.8±15.66,P<0.01）。3.血浆总脂联素水平在HL组与正常对照组相比显著升高（8.83±0.51vs6.02±0.46, P<0.01），在HCHD组则显著降低（3.71±0.44vs6.02±0.46,P<0.01）。脂联素三种存在形式的进一步检测结果显示：HMW与MMW水平在HL组均显著升高（P均<0.01），几乎为对照组的两倍，HCHD组则又下降至几乎正常组水平；而LMW在HL组和HCHD组均显著降低（P均<0.01）。4. HL组的患者，血浆LDL-C水平与总脂联素水平（r=0.793，P<0.01）、HMW（r=0.815，P<0.01）及MMW（r=0.668，P<0.01）均呈正相关，但与LMW呈负相关（r=-0.391，P<0.05），血浆LDL-C水平还与血浆NT水平呈正相关（r=0.909，P<0.05）。血浆总脂联素水平（r=-0.539，P<0.01）、HMW（r=-0.674，P<0.01）、MMW（r=-0.526，P<0.01）均与TNF-α呈负相关，但LMW与TNF-α呈正相关（r=0.397，P<0.05）。5. HCHD组患者的血浆LDL-C水平与总脂联素水平、HMW、MMW、LMW及NT均无统计学相关性（P>0.05），总脂联素水平、HMW、MMW、LMW与TNF-α也均无统计学相关性（P>0.05），相关系数r均较小。结论：1.首次发现在血脂异常程度较轻的LDL-C边缘升高患者中，血浆中的ONOO~-标记物—NT水平显著升高，提示患者此时可能出现内皮氧化/硝化应激损伤。此过程中伴有脂联素代偿性分泌增加，同时抑制了炎性因子TNF-α的生成。2.在血脂异常程度较重的高胆固醇血症合并有冠心病患者中，血浆ONOO~-标记物—NT水平进一步升高，伴有TNF-α水平的显著升高，但脂联素水平显著下降，提示脂联素分泌不足，血管内皮保护能力下降，氧化/硝化损伤及炎症反应进一步加重，导致了冠状动脉粥样硬化性损伤。3.血浆总脂联素3种不同分子量形式中，HMW和MMW形式可能起着主要的保护血管的作用。